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锦青

铁虫 (初入文坛)

不知道楼主,是怎么解决的呢,我现在也是连了快大半年了,还是连不上,都快愁死了,求解决的办法???跪谢
happy everyday
31楼2013-12-13 20:50:34
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三蛰

铜虫 (小有名气)

看来TA克隆真受欢迎
我不会!
32楼2013-12-13 21:51:32
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xinmengfeng

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by huguangdong at 2013-08-13 12:21:57
1 首先确认你这个2*ES taq酶是高保真酶还是普通TAQ聚合酶,如果是高保真酶,PCR扩增产物为平末端,需要加A处理才能进行TA克隆,否则肯定失败,如果是TAQ酶可以直接操作。
2 看你的描述,连接温度应该没有问题,一般 ...

你好,我想请问你,加A尾,可不可以直接用普通的taq酶mix加尾,如果可以,条件的是怎样的

发自小木虫Android客户端
33楼2016-10-24 14:23:52
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墨与成长

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by changes at 2013-08-13 12:12:51
因为你的目的片段约2000bp,载体大小月2700bp。T/A克隆的效率应该不是很高,另外你提到回收的条带非常亮比marker的浓度都高,要注意减少片段的量了,可能1:6的比例不是很合适,目的片段浓度高了,影响连接的效率。
...

若是条带较长为4600,会导致连接效率降低吗。最近在做TA克隆总是连不上,短片段没问题,长一点的就一直连不上去,一直是一些短片段,虽然也是我的目的片段,但是不完整是什么原因呢
34楼2018-10-11 18:53:18
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