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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » HPLC梯度洗脱有杂峰
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Tony_young

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我实验室的也是P680
第一，本来跑梯度多多少少都会有一点杂峰，只要不是很明显的话，影响不大，本来梯度基线都在飘，要是梯度大的话飘的更厉害。
第二，进一针纯甲醇，对比标准品溶液的图，看看杂峰的位置和大小，如果有重复出现的现象，那就是仪器的问题了，可能是仪器的管路系统。解决办法  1，用纯甲醇清洗定量环。2，用纯甲醇冲整个管路系统。3，吸收池脏了，之前做实验进样过浓，吸收池、管路系统会沾有一些，没有冲干净。这个的话，一般是吸收池，要找工程师来解决了。

如果纠结不知道怎么办的话，就直接打电话问工程师，其实你花了钱买了仪器，戴安的都是终生免费维修的，工程师打电话问问题，又不收费，只是换零件收钱罢了。有一些问题，多跟他们交流一下，真的会学到很多东西的
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11楼2013-08-05 22:59:37
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Mr泡面

金虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by Tony_young at 2013-08-05 22:59:37
我实验室的也是P680
第一，本来跑梯度多多少少都会有一点杂峰，只要不是很明显的话，影响不大，本来梯度基线都在飘，要是梯度大的话飘的更厉害。
第二，进一针纯甲醇，对比标准品溶液的图，看看杂峰的位置和大小， ...

谢谢你的建议，补充一下，我设定的波长是203nm。之前我已经把管道连同柱子冲过好几次，柱子也换过了。可以排除掉柱子的问题。进了甲醇、两种标准品都在差不多的位置出峰。而且都是在梯度变化较快的地方。已经做了很长一段时间还是有这些杂峰。请问有可能吸收池脏了之后一直冲不干净吗？
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12楼2013-08-06 10:23:02
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Tony_young

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
Mr泡面: 金币+2, ★有帮助, 那我明天试下换台液相试试，谢谢 2013-08-06 17:39:58
引用回帖:
12楼: Originally posted by Mr泡面 at 2013-08-06 10:23:02
谢谢你的建议，补充一下，我设定的波长是203nm。之前我已经把管道连同柱子冲过好几次，柱子也换过了。可以排除掉柱子的问题。进了甲醇、两种标准品都在差不多的位置出峰。而且都是在梯度变化较快的地方。已经做了很 ...

210以下甲醇跟乙腈都有吸收的～可能是这个原因～吸收池要是用久了脏了是很难冲干净的～我遇见过这种情况，打电话让工程师来清理的

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13楼2013-08-06 12:14:11
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zhangkunnb

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Mr泡面: 金币+2, ★有帮助, 杂质峰是出现在我梯度最后面变化较快的时候，而且有好几个，特别是在梯度结束时，有一个很大的峰拖尾很长。 2013-08-06 17:39:17
有可能还是柱子的问题；杂质峰出峰时间是多少，如果出峰时间短的话有可能是溶剂峰；也有可能是检测池里进气泡了，噪声太大，导致诡峰出现。
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奋斗！
14楼2013-08-06 13:26:51
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flowreader

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可能是脏了，管路清洗一下，流通池拆下来用硝酸洗一下。
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15楼2013-08-21 09:50:47
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素洁百羽

新虫 (初入文坛)
想请教一下这个问题怎么解决的？也是做药材指纹遇到了同样问题，对照品和空白都有挺高的杂峰，冲洗也冲不掉，仪器和柱子都换过了

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16楼2018-07-14 19:44:23
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