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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请问怎么能准确的取线虫
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yzlxyly

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问怎么能准确的取线虫

我刚开始做秀丽线虫方面的实验，怎么能比较准确快速的取线虫，比如要取50只做实验，如果一只一只挑去的话很慢，而且会损伤线虫。谢谢各位了！
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1楼 2013-08-03 14:54:21
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-11-07 09:04:14
silicare: 金币+5, BioEPI+1, 应助指数+1, 谢谢参与 2013-11-11 18:04:35
1.准确计数只能一只只挑。我们一组低于300只的都得挑，多于1000只的可以冲洗。但要设置其他内参定量，如蛋白定量，内参基因，荧光空白等。
2.线虫生存需要一定的离子强度，所以液体培养数小时以上要用M9缓冲溶液（建议不要使用纯水，因为纯水对线虫而言是低渗液。）S buffer适于更久的培养。
3.挑线虫熟练的话50只，5min左右，快的2min。不要怕，练熟了就好了。自己做一个好用些的挑虫器。一天1000只完全不是问题。
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5楼2013-09-10 15:59:29
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fayzhao

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
silicare: 金币+2, 应助指数+1, 谢谢参与 2013-11-11 18:05:00
50只还是挑的挺快的呀，我们都是挑的，多练练手，以后挑虫子基本都没有什么问题了
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9楼2013-11-08 20:01:05
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普通回帖

S09090703270

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-11-07 09:04:05
线虫很小，一般做试验也就用一个约数，在体视镜下观察母液线虫含量，然后进行稀释倍数，就可以得到你想要的，这是约数，虽然不准，但足以说明问题，希望对你有帮助！
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2楼2013-08-23 11:10:37
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angel梅

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by S09090703270 at 2013-08-23 11:10:37
线虫很小，一般做试验也就用一个约数，在体视镜下观察母液线虫含量，然后进行稀释倍数，就可以得到你想要的，这是约数，虽然不准，但足以说明问题，希望对你有帮助！

我想问下，为什么我晚上用无菌水冲洗的线虫放置一夜全死光了？？？？
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3楼2013-09-04 08:04:31
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S09090703270

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by angel梅 at 2013-09-04 08:04:31
我想问下，为什么我晚上用无菌水冲洗的线虫放置一夜全死光了？？？？...

最好放在4度冰箱保存，现存离开活体组织很容易死亡，正常现象。
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4楼2013-09-04 10:24:54
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莞欣

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-09-10 15:59:29
1.准确计数只能一只只挑。我们一组低于300只的都得挑，多于1000只的可以冲洗。但要设置其他内参定量，如蛋白定量，内参基因，荧光空白等。
2.线虫生存需要一定的离子强度，所以液体培养数小时以上要用M9缓冲溶液（ ...

请问漂白裂解法得到的秀丽线虫的虫卵24h了还不孵化是怎么回事。。。
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我的淘宝小店，主营女装、女士精品哦http://yiyixiu.taobao.com/
6楼2013-11-06 16:47:41
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hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
silicare: 金币+2, 应助指数+1 2013-11-11 18:04:47
引用回帖:
6楼: Originally posted by 莞欣 at 2013-11-06 16:47:41
请问漂白裂解法得到的秀丽线虫的虫卵24h了还不孵化是怎么回事。。。...

裂解时间太长或震荡太剧烈或没将裂解液清洗干净，导致虫卵死亡了。延长时间,3~4d后看有无L4期的虫子。L1有时太小找不到。注意环境温度，和培养温度，一定要保证20度左右。
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7楼2013-11-07 08:51:33
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wangzhongl

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以用铂丝做挑虫器，挺快的。
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insistence
8楼2013-11-07 11:05:14
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hl16010921

木虫 (正式写手)
★
silicare: 金币+1, 应助指数+1 2013-11-11 18:05:11
wizardfan: 应助指数-1, 不符合应助指数条件 2013-11-12 08:57:59
引用回帖:
3楼: Originally posted by angel梅 at 2013-09-04 08:04:31
我想问下，为什么我晚上用无菌水冲洗的线虫放置一夜全死光了？？？？...

用M9洗。纯水是低渗。而且pH降得太快
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10楼2013-11-11 14:34:29
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