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yzlxyly

新虫 (初入文坛)

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3楼: Originally posted by angel梅 at 2013-09-04 08:04:31
我想问下,为什么我晚上用无菌水冲洗的线虫放置一夜全死光了????...

可能是因为水是低渗吧,必须用M9buffer,这是线虫的生理盐水。我也是刚开始做,希望帮到你。
11楼2014-03-14 14:47:12
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yzlxyly

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-09-10 15:59:29
1.准确计数只能一只只挑。我们一组低于300只的都得挑,多于1000只的可以冲洗。但要设置其他内参定量,如蛋白定量,内参基因,荧光空白等。
2.线虫生存需要一定的离子强度,所以液体培养数小时以上要用M9缓冲溶液( ...

谢谢啊!回答的很详细。
12楼2014-06-02 17:04:35
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yzlxyly

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-09-10 15:59:29
1.准确计数只能一只只挑。我们一组低于300只的都得挑,多于1000只的可以冲洗。但要设置其他内参定量,如蛋白定量,内参基因,荧光空白等。
2.线虫生存需要一定的离子强度,所以液体培养数小时以上要用M9缓冲溶液( ...

再请教一下您,我同期话处理后,第二天线虫的培养皿上有好多雾状东西,像是在有菌的皿上同期话的,但是我可以肯定皿是干净的。不知道是什么原因?
13楼2014-06-02 17:06:51
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hl16010921

木虫 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by yzlxyly at 2014-06-02 17:06:51
再请教一下您,我同期话处理后,第二天线虫的培养皿上有好多雾状东西,像是在有菌的皿上同期话的,但是我可以肯定皿是干净的。不知道是什么原因?...

雾状?你是固体NGM培养的吧?倒置培养?NGM平板是新的还是放置几天的?新倒的平板水分含量高,一般放置2天以上(不要过久)让平板干些,染菌的概率小些。裂解后染菌,一般多发于平板水分高正置培养的情况。再有培养箱内染菌(保持湿度的水加1%硫酸铜会有改善,经常清洁,酒精擦拭,及时清理染菌的平板)。相关溶液的污染,特别是M9和磷酸盐,常常配一次用好久,可能引入污染。
14楼2014-06-03 18:51:04
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