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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请问怎么能准确的取线虫
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yzlxyly

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by angel梅 at 2013-09-04 08:04:31
我想问下，为什么我晚上用无菌水冲洗的线虫放置一夜全死光了？？？？...

可能是因为水是低渗吧，必须用M9buffer，这是线虫的生理盐水。我也是刚开始做，希望帮到你。
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11楼2014-03-14 14:47:12
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yzlxyly

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-09-10 15:59:29
1.准确计数只能一只只挑。我们一组低于300只的都得挑，多于1000只的可以冲洗。但要设置其他内参定量，如蛋白定量，内参基因，荧光空白等。
2.线虫生存需要一定的离子强度，所以液体培养数小时以上要用M9缓冲溶液（ ...

谢谢啊！回答的很详细。
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12楼2014-06-02 17:04:35
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yzlxyly

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-09-10 15:59:29
1.准确计数只能一只只挑。我们一组低于300只的都得挑，多于1000只的可以冲洗。但要设置其他内参定量，如蛋白定量，内参基因，荧光空白等。
2.线虫生存需要一定的离子强度，所以液体培养数小时以上要用M9缓冲溶液（ ...

再请教一下您，我同期话处理后，第二天线虫的培养皿上有好多雾状东西，像是在有菌的皿上同期话的，但是我可以肯定皿是干净的。不知道是什么原因？
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13楼2014-06-02 17:06:51
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hl16010921

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by yzlxyly at 2014-06-02 17:06:51
再请教一下您，我同期话处理后，第二天线虫的培养皿上有好多雾状东西，像是在有菌的皿上同期话的，但是我可以肯定皿是干净的。不知道是什么原因？...

雾状？你是固体NGM培养的吧？倒置培养？NGM平板是新的还是放置几天的？新倒的平板水分含量高，一般放置2天以上（不要过久）让平板干些，染菌的概率小些。裂解后染菌，一般多发于平板水分高正置培养的情况。再有培养箱内染菌（保持湿度的水加1%硫酸铜会有改善，经常清洁，酒精擦拭，及时清理染菌的平板）。相关溶液的污染，特别是M9和磷酸盐，常常配一次用好久，可能引入污染。
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14楼2014-06-03 18:51:04
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