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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物效应评价 » GFP转染荧光很弱是怎么回事？
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骑着蜗牛追火箭

木虫 (著名写手)

纳米小生

[求助] GFP转染荧光很弱是怎么回事？

如题，我用PEI25K和我做的载体向HeLa细胞中转染EGFP质粒，结果发现有绿色荧光的细胞从个数上讲还能接受，但是亮度极低，不知道是什么原因，求高手指点一二！
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1楼 2013-08-03 10:52:51
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来日方丈

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
markar: 金币+1, 感谢回帖交流！ 2013-08-03 13:59:24
骑着蜗牛追火箭(markar代发): 金币+2, 代发金币奖励！ 2013-10-17 20:28:16
GFP表达量不高呗，
你用的什么启动子？
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2楼2013-08-03 11:05:34
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骑着蜗牛追火箭

木虫 (著名写手)

纳米小生
引用回帖:
2楼: Originally posted by 来日方丈 at 2013-08-03 11:05:34
GFP表达量不高呗，
你用的什么启动子？

pEGFP-N1
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3楼2013-08-03 11:23:17
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lin3321

铜虫 (初入文坛)
请问你这边是不是有马尔文2000可以提供有偿检测呢？
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从事化工原料行业
4楼2013-09-13 10:42:01
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骑着蜗牛追火箭

木虫 (著名写手)

纳米小生
引用回帖:
4楼: Originally posted by lin3321 at 2013-09-13 10:42:01
请问你这边是不是有马尔文2000可以提供有偿检测呢？

马尔文ZS90，可以接外样
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5楼2013-09-14 12:00:29
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hsingyu

木虫 (正式写手)
★ ★
markar: 金币+1, 感谢回帖交流！ 2013-09-15 20:56:43
骑着蜗牛追火箭(markar代发): 金币+1, 代发金币奖励！ 2013-10-17 20:28:44
亮度你不能改变曝光时间吗，HeLa转的本来就少
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做最好的自己~
6楼2013-09-14 21:04:31
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骑着蜗牛追火箭

木虫 (著名写手)

纳米小生
引用回帖:
6楼: Originally posted by hsingyu at 2013-09-14 21:04:31
亮度你不能改变曝光时间吗，HeLa转的本来就少

试过了，加长曝光时间，背景会比较强。
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7楼2013-09-15 09:47:49
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hsingyu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
markar: 金币+1, 应助指数+1, 感谢回帖交流！ 2013-09-15 20:57:08
我们的显微镜软件有扣背景功能，还有我看了下我自己做的，亮度确实还可以，不知你做的N/P多少？
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做最好的自己~
8楼2013-09-15 12:08:22
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骑着蜗牛追火箭

木虫 (著名写手)

纳米小生
引用回帖:
8楼: Originally posted by hsingyu at 2013-09-15 12:08:22
我们的显微镜软件有扣背景功能，还有我看了下我自己做的，亮度确实还可以，不知你做的N/P多少？

N/P是10，扣完背景，把细胞颜色也扣得差不多了，试过了的
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9楼2013-09-15 16:26:18
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hsingyu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 骑着蜗牛追火箭 at 2013-09-15 16:26:18
N/P是10，扣完背景，把细胞颜色也扣得差不多了，试过了的...

那应该是你的质粒问题吧
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做最好的自己~
10楼2013-09-15 16:27:21
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