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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » loading buffer 有好几种浓度的（5X,6X,10X）,做蛋白质，核酸电泳时，该怎么选择呢
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guduyiyu

金虫 (正式写手)

[求助] loading buffer 有好几种浓度的（5X,6X,10X）,做蛋白质，核酸电泳时，该怎么选择呢

loading buffer 有好几种浓度的（5X,6X,10X）,做蛋白质，核酸电泳时，该怎么选择呢,谢谢啊
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不努力永远不知道自己有多优秀
1楼 2013-07-31 16:10:56
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秋水素心

银虫 (小有名气)
做蛋白时上样浓度为1
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认真过好每一天！
2楼2013-07-31 19:38:47
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她城无岁月

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
做蛋白的时候得把Loading  buffer稀释成1成.
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3楼2013-07-31 22:39:44
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不管是几X的buffer，在上样时的终浓度是1X。
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4楼2013-07-31 23:18:53
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Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
guduyiyu(silicare代发): 金币+2, 2013-08-01 10:58:20
silicare: BioEPI+1 2013-08-01 10:58:30
没实质区别，总之工作浓度是1X 就对了。需要注意的是，由于点样孔容量有限，所以如果你样品浓度过高可以用低倍数，样品浓度低就用高倍数，以便load 更多的样品！
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互助互励，共奋共进！！
5楼2013-08-01 08:56:31
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ytflark

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有6xLOADING BUFFER 和10x的loading buffer ，看你手里有哪种。所谓的6x，是指其浓度浓缩了六倍，你稀释6倍后使用。所谓的稀释就是你的样品：loading buffer的体积比为5：1.举个例子，取样品10ul，加2ul的loading buffer混匀后就可以点样了
常用的有6X的，10X的，意思是当你加样品1ul，6Xloading buffer加六分之一ul,要用10X的加十分之一ul混匀就行了，每次点样量视情况而定，一般5微升左右都可，这没啥严格要求的
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11
6楼2013-08-01 17:23:55
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guduyiyu

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Sthunder at 2013-08-01 08:56:31
没实质区别，总之工作浓度是1X 就对了。需要注意的是，由于点样孔容量有限，所以如果你样品浓度过高可以用低倍数，样品浓度低就用高倍数，以便load 更多的样品！

工作浓度？你是指的buffer:样品的比例中buffer占一份吗，还是别的什么，麻烦说清楚啊
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不努力永远不知道自己有多优秀
7楼2013-08-02 13:47:00
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Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by guduyiyu at 2013-08-02 13:47:00
工作浓度？你是指的buffer:样品的比例中buffer占一份吗，还是别的什么，麻烦说清楚啊...

不仅仅是loading buffer，在配置试剂的时候都习惯于陪母液也就是stock。所谓的工作浓度也就是最终使用浓度，一般都是1X，默认的也是1X，但偶尔也会遇到0.5X 。
eg：你要用0.1 M的 NaCL，配置1M的溶液，就称为 10 X。使用的时候稀释10倍就好了。
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互助互励，共奋共进！！
8楼2013-08-02 23:00:12
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