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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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blueghost2

新虫 (小有名气)


[交流] 大家做wb转膜时有没有发生这样的事?

昨天同时跑了两块胶,上样的蛋白和量一模一样,,一块做湿转,一块用半干转。封闭,一抗一样二抗一样,总之除了转膜方法,其他条件完全一样。拍照的结果是:用半干转的显示了两条带,而湿转的是一条带。

ps:湿转设定:30v 400mA  实际达到30v 70mA左右,过夜
       干转设定:25v 65mA    实际达到10v 65mA   一个小时
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实心小白菜

新虫 (初入文坛)


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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-30 20:35:41
blueghost2: 金币+3 2013-08-02 12:00:19
就算是同一种转膜方法,最后得到的结果都有可能不一样,更何况转膜方法都不一样,有两条带的话通过大小判断呗
2楼2013-07-30 18:43:03
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红飞侠

铁虫 (初入文坛)



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湿转的电流是不是太小啊,我们一般都是恒定电流是转的。
3楼2013-08-02 14:05:46
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aoda123

木虫 (正式写手)



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湿转电流太小,而且你过夜转,可能把蛋白转过膜了
5楼2013-08-02 15:06:39
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wswsjz

木虫 (职业作家)



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Good luck everyday
6楼2013-08-02 16:01:27
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lugylucy

新虫 (初入文坛)


★ ★
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-08-02 21:56:31
我个人觉得跟你的目的蛋白的分子量有关系,分子量不同导致蛋白转过去的效率不一样。我之前查了一些资料:分子量大于100kDa的时候建议湿转,半干转不够稳定并且效率不高。但小分子的话半干转效果很好,我们实验室基本都是半干转。
7楼2013-08-02 19:52:15
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简单回复
2013-08-02 14:18   回复  
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