24小时热门版块排行榜    

查看: 1310  |  回复: 6

cj黑甲虫

新虫 (初入文坛)

[求助] 转膜不成功

同时做了两块胶,相同的进样。一块用于考染,另一块用于转膜。考染的出现了清晰的蛋白条带。另一块胶用于转膜,转印后,PVDF膜上有条带清晰的预染Marker,但是用丽春红染液对的PVDF膜及胶进行染色,均未发现任何条带。
蛋白去了那里?求解!
转印条件:Bio-Rad湿转,300MA,1h,冰浴,分子量20、40、60、80KDa,PVDF膜。
另:之前用过同样的转印条件,转膜成功过。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cj黑甲虫: 金币+5, ★有帮助, 因为WESTERN没有条带才查了PVDF膜,结果就出现了我刚才的疑问 2013-07-30 09:20:43
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-07-31 09:19:03
如果mark清晰,那说明转膜是没哟问题的,如果你丽春红染液没看到条带的话,有可能是你load量不够,因为丽春红染液灵敏度似乎不是很高,不过做western的话应该没太大问题!Good luck!
互助互励,共奋共进!!
2楼2013-07-29 21:54:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xz2001199802

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cj黑甲虫: 金币+2, ★有帮助, 谢谢回帖 2013-07-30 09:21:16
我只能说,倒过去查一遍,没错的话,重来一遍
越学越无知
3楼2013-07-29 21:54:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cauxiaobear

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
cj黑甲虫: 金币+1, 不知道在说什么 2013-08-09 09:36:39
mei yongguo zhge ranliao.
bu tai qingchu
buguo chongzuo shi zuijia xuanze
4楼2013-07-30 15:15:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ytflark

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
膜的厚度不知道?你转的时间太长!
11
5楼2013-08-01 14:49:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiang701820

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cj黑甲虫: 金币+2, ★有帮助, 同一批次的立春红染液,在之前染色的时候成功了 2013-08-09 09:37:50
考马斯亮蓝染色比立春红染色灵敏不止一点点,但是据楼主说立春红染色一点东西都没有我觉得不像是load太少,因为总有表达丰度高的蛋白的,转膜时marker都转到膜上了,所以说转膜应该也没问题,个人觉得很有可能是立春红配错了,或者失效了!
重新配立春红,再试一试,一定要注意加冰醋酸!
6楼2013-08-01 17:16:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红飞侠

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
cj黑甲虫: 金币+2, ★有帮助, 同楼上 2013-08-09 09:38:19
我觉得丽春红可能有问题,考染的胶没有问题,转膜的Marker也清晰,说明转膜应该是成功的,最好重新配置丽春红,重做一次。加油!
好的资源共同分享
7楼2013-08-02 14:11:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 cj黑甲虫 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +10 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 17:18 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 14/700 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:23 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 15/750 2026-11-06 13:49 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 18/900 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 10/500 2026-11-06 12:32 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 09:01 by 2lRNluKrJpwL
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:51 by qL1cU46YIdK0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
[基金申请] 各位基础老师们,看完中央《从严治党》的决定后,对学术界更加有信心了吧 +5 iaeyuan 2026-11-01 5/250 2026-11-04 14:43 by jinchengzi
信息提示
请填处理意见