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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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果A果

新虫 (初入文坛)

[求助] 植物叶片红叶石楠石蜡切片,组织不完整,碎的,求解啊,急!!各位好心的大侠帮帮忙吧 已有1人参与

植物叶片红叶石楠石蜡切片,切片展开后在显微镜下观察植物组织都完整,上下表皮都完整,栅栏组织也排列整齐,但55℃烘片4小时后,脱蜡(纯二甲苯1h两次,1/2二甲苯1/2酒精5min,酒精梯度100%,85%,70%,50%,30%,水各5min,)番红染色过夜,脱色5s,固绿10s,脱色5s,封片后在显微镜下观察组织全碎了,而且是一段有一段没有的,番红也染不上,观察不到红色,请问这是什么原因?求各位大侠帮助啊,急啊.
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何超小

金虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wjj416 at 2013-07-30 10:27:03
我曾经做过的石蜡切片,你的番红染不上色肯定是有问题的,要完全溶解,完全溶解的番红是没有颗粒状的东西啦,而且颜色很深。我之前也没染上番红。溶解后放在阳光下照射一段时间,我之前怎么都不成后来买了一瓶新的就 ...

要是盖玻片的时候有气泡,可以轻轻按压吗
5楼2017-05-14 22:19:37
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walkmanloney

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个是我自己做石蜡切片的脱蜡程序:主要参考了科学出版社出版李和平主编《植物显微技术(第二版)》部分内容。一般的组织都可以切得出来。
•脱蜡:
1、        二甲苯Ⅰ,30min。
2、        二甲苯Ⅱ,3min。
3、        无水乙醇与二甲苯1:1溶液,3min。
•复水
1、        无水乙醇,3min。
2、        95%乙醇Ⅰ,3min。
3、        80%乙醇,3min。
4、        70%乙醇,3min。
5、        50%乙醇,3min。(50%乙醇=50mL95%乙醇+45mL蒸馏水)
6、        30%乙醇,3min。(30%乙醇=30mL95%乙醇+65mL蒸馏水)
7、        蒸馏水Ⅰ,3min。
•染色:
番红水溶液(1%),2h。
番红染色液的配制:
成分        用量        配制方法
番红        1g        将番红溶于蒸馏水中,使其完全溶解,过滤。
蒸馏水        100mL       
•脱水:
1、        蒸馏水Ⅱ,3min。
2、        蒸馏水Ⅰ,3min。
3、        30%乙醇,3min。
4、        50%乙醇,3min。
5、        70%乙醇,3min。
6、        80%乙醇,3min。
7、        95%乙醇,3min。
•染色:
固绿水溶液(95%),50s。
固绿染色液的配制:
成分        用量        配制方法
固绿        0.5g        将固绿溶于乙醇中,使其完全溶解,过滤。
95%乙醇        100mL       
•透明:
1、95%乙醇Ⅱ,3min。
2、无水乙醇,3min。
3、无水乙醇与二甲苯1:1溶液,3min。
4、        二甲苯Ⅰ,3min。
5、        二甲苯Ⅱ,3min。
封片
   从上一步的二甲苯Ⅱ中捞出(戴手套),趁二甲苯没干之前在载玻片正面用玻璃棒滴上2~3滴中性树胶(中性树胶与二甲苯3:1),然后用镊子将盖玻片盖上,拿到温箱40℃烘干两天。
2楼2013-07-27 10:39:14
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wjj416

新虫 (初入文坛)

我曾经做过的石蜡切片,你的番红染不上色肯定是有问题的,要完全溶解,完全溶解的番红是没有颗粒状的东西啦,而且颜色很深。我之前也没染上番红。溶解后放在阳光下照射一段时间,我之前怎么都不成后来买了一瓶新的就可以完全溶解啦。这样效果还可以。把片子一定要展开。动作一定要轻轻的,你在封片的过程成一定不要使劲挤压片子或者敲打它,容易碎啦。盖盖玻片时候要侧面慢慢盖。你可以试试看
3楼2013-07-30 10:27:03
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何超小

金虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wjj416 at 2013-07-30 10:27:03
我曾经做过的石蜡切片,你的番红染不上色肯定是有问题的,要完全溶解,完全溶解的番红是没有颗粒状的东西啦,而且颜色很深。我之前也没染上番红。溶解后放在阳光下照射一段时间,我之前怎么都不成后来买了一瓶新的就 ...

配置番红溶液后要在阳光下照一段时间?
4楼2017-05-14 22:18:19
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