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植物叶片红叶石楠石蜡切片，组织不完整，碎的，求解啊，急！！各位好心的大侠帮帮忙吧 已有1人参与
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| 植物叶片红叶石楠石蜡切片，切片展开后在显微镜下观察植物组织都完整，上下表皮都完整，栅栏组织也排列整齐，但55℃烘片4小时后，脱蜡（纯二甲苯1h两次，1/2二甲苯1/2酒精5min，酒精梯度100%，85%，70%，50%，30%，水各5min，）番红染色过夜，脱色5s，固绿10s，脱色5s,封片后在显微镜下观察组织全碎了，而且是一段有一段没有的，番红也染不上，观察不到红色，请问这是什么原因？求各位大侠帮助啊，急啊. |
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walkmanloney
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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这个是我自己做石蜡切片的脱蜡程序：主要参考了科学出版社出版李和平主编《植物显微技术（第二版）》部分内容。一般的组织都可以切得出来。 •脱蜡： 1、 二甲苯Ⅰ，30min。 2、 二甲苯Ⅱ，3min。 3、 无水乙醇与二甲苯1：1溶液，3min。 •复水 1、 无水乙醇，3min。 2、 95%乙醇Ⅰ，3min。 3、 80%乙醇，3min。 4、 70%乙醇，3min。 5、 50%乙醇，3min。（50%乙醇=50mL95%乙醇+45mL蒸馏水） 6、 30%乙醇，3min。（30%乙醇=30mL95%乙醇+65mL蒸馏水） 7、 蒸馏水Ⅰ，3min。 •染色： 番红水溶液（1%），2h。 番红染色液的配制： 成分 用量 配制方法 番红 1g 将番红溶于蒸馏水中，使其完全溶解，过滤。 蒸馏水 100mL •脱水： 1、 蒸馏水Ⅱ，3min。 2、 蒸馏水Ⅰ，3min。 3、 30%乙醇，3min。 4、 50%乙醇，3min。 5、 70%乙醇，3min。 6、 80%乙醇，3min。 7、 95%乙醇，3min。 •染色： 固绿水溶液（95%），50s。 固绿染色液的配制： 成分 用量 配制方法 固绿 0.5g 将固绿溶于乙醇中，使其完全溶解，过滤。 95%乙醇 100mL •透明： 1、95%乙醇Ⅱ，3min。 2、无水乙醇，3min。 3、无水乙醇与二甲苯1：1溶液，3min。 4、 二甲苯Ⅰ，3min。 5、 二甲苯Ⅱ，3min。 封片 从上一步的二甲苯Ⅱ中捞出（戴手套），趁二甲苯没干之前在载玻片正面用玻璃棒滴上2～3滴中性树胶（中性树胶与二甲苯3：1），然后用镊子将盖玻片盖上，拿到温箱40℃烘干两天。 |
2楼2013-07-27 10:39:14
3楼2013-07-30 10:27:03
何超小
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何超小
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lixg
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