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植物叶片红叶石楠石蜡切片,组织不完整,碎的,求解啊,急!!各位好心的大侠帮帮忙吧 已有1人参与
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| 植物叶片红叶石楠石蜡切片,切片展开后在显微镜下观察植物组织都完整,上下表皮都完整,栅栏组织也排列整齐,但55℃烘片4小时后,脱蜡(纯二甲苯1h两次,1/2二甲苯1/2酒精5min,酒精梯度100%,85%,70%,50%,30%,水各5min,)番红染色过夜,脱色5s,固绿10s,脱色5s,封片后在显微镜下观察组织全碎了,而且是一段有一段没有的,番红也染不上,观察不到红色,请问这是什么原因?求各位大侠帮助啊,急啊. |
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walkmanloney
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【答案】应助回帖
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这个是我自己做石蜡切片的脱蜡程序:主要参考了科学出版社出版李和平主编《植物显微技术(第二版)》部分内容。一般的组织都可以切得出来。 •脱蜡: 1、 二甲苯Ⅰ,30min。 2、 二甲苯Ⅱ,3min。 3、 无水乙醇与二甲苯1:1溶液,3min。 •复水 1、 无水乙醇,3min。 2、 95%乙醇Ⅰ,3min。 3、 80%乙醇,3min。 4、 70%乙醇,3min。 5、 50%乙醇,3min。(50%乙醇=50mL95%乙醇+45mL蒸馏水) 6、 30%乙醇,3min。(30%乙醇=30mL95%乙醇+65mL蒸馏水) 7、 蒸馏水Ⅰ,3min。 •染色: 番红水溶液(1%),2h。 番红染色液的配制: 成分 用量 配制方法 番红 1g 将番红溶于蒸馏水中,使其完全溶解,过滤。 蒸馏水 100mL •脱水: 1、 蒸馏水Ⅱ,3min。 2、 蒸馏水Ⅰ,3min。 3、 30%乙醇,3min。 4、 50%乙醇,3min。 5、 70%乙醇,3min。 6、 80%乙醇,3min。 7、 95%乙醇,3min。 •染色: 固绿水溶液(95%),50s。 固绿染色液的配制: 成分 用量 配制方法 固绿 0.5g 将固绿溶于乙醇中,使其完全溶解,过滤。 95%乙醇 100mL •透明: 1、95%乙醇Ⅱ,3min。 2、无水乙醇,3min。 3、无水乙醇与二甲苯1:1溶液,3min。 4、 二甲苯Ⅰ,3min。 5、 二甲苯Ⅱ,3min。 封片 从上一步的二甲苯Ⅱ中捞出(戴手套),趁二甲苯没干之前在载玻片正面用玻璃棒滴上2~3滴中性树胶(中性树胶与二甲苯3:1),然后用镊子将盖玻片盖上,拿到温箱40℃烘干两天。 |
2楼2013-07-27 10:39:14
3楼2013-07-30 10:27:03
何超小
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