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zoe_2012

金虫 (初入文坛)

[求助] 怎么测得的DNA A260值A280小??? 已有1人参与

试剂盒提取-20°冻存的组织DNA,
取样10微升稀释到1毫升,紫外分光光度计测得A260:0.331,A280:0.395,
取样50微升稀释到1毫升,紫外分光光度计测得A260:0.314,A280:0.375,
理论上A260/A280值应该在1.6-1.8之间,那我测得的结果岂不是很离谱?
对于这个结果很是疑惑,急需高人指点一二!!!
试剂盒提取很耗钱财,尤其是大量提取样品,可有比较合适的替代方案?
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IfIcould,Iwould.
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hym0411

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zoe_2012(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-07-25 22:44:31
试着换个分光光度计试试,一般都是同一台分光光度计连同标准品一起测,然后根据比例得出含量,这个每台分光光度计都有不同的差异。
生而无涯
2楼2013-07-25 22:32:33
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hyphen007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
同意楼上,不过也有可能是污染严重
3楼2013-07-25 22:56:16
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18707199453

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by hyphen007 at 2013-07-25 22:56:16
同意楼上,不过也有可能是污染严重

可能组织有降解,我也遇到过此类问题,也可能操作过程中某些步骤不太规范在成降解。多练习一下,细心点。
4楼2013-07-29 17:19:27
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zoe_2012

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 18707199453 at 2013-07-29 17:19:27
可能组织有降解,我也遇到过此类问题,也可能操作过程中某些步骤不太规范在成降解。多练习一下,细心点。...

你也是试剂盒提取的吗,60uL定容的话,放到普通的分光光度计也是可以测量队的出来的对吗啊,你碰到这个问题是怎么解决了的呢?最后,
IfIcould,Iwould.
5楼2013-08-06 20:27:50
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yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

是不是放久了或者稀释(液体)时候有污染?
学习使你立于不败之地
6楼2013-08-06 21:03:16
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zoe_2012

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by yuren2009 at 2013-08-06 21:03:16
是不是放久了或者稀释(液体)时候有污染?

可是,这样会导致这两个数值有颠倒的差别吗?
IfIcould,Iwould.
7楼2013-08-13 14:24:19
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安静旅游吧

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

同求。我也遇见这样现象,这是为什么呢?期待楼主回答
8楼2014-12-05 09:27:20
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