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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助：怎么把2个质粒共同电转进同一个细胞?
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ZHRO

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助：怎么把2个质粒共同电转进同一个细胞?

怎么把2个质粒共同电转进同一个细胞 其中一个质粒是ptrc99A （amp+）另外一个载体是cm抗性
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1楼 2013-07-24 09:37:10
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ZHRO(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-24 11:25:10
ZHRO: 金币+2, ★有帮助 2013-07-24 13:48:44
就按照普通步骤，质粒一起加就是了，热激也没问题。。
最后涂板上面带两种抗生素就行了，唯一要确定的就是你的两个质粒ori是兼容的。
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2楼2013-07-24 10:41:14
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liyongliangx

铜虫 (小有名气)
2楼说的对
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3楼2013-07-24 13:14:31
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ZHRO

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Haibara_Ai at 2013-07-24 10:41:14
就按照普通步骤，质粒一起加就是了，热激也没问题。。
最后涂板上面带两种抗生素就行了，唯一要确定的就是你的两个质粒ori是兼容的。

怎么看2个ori是不是兼容的???可不可以先电一个做成感受态再电另外一个？？
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4楼2013-07-24 14:06:59
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ZHRO

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liyongliangx at 2013-07-24 13:14:31
2楼说的对

怎么看2个ori是不是兼容的???可不可以先电一个做成感受态再电另外一个？？
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5楼2013-07-24 14:09:08
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xz2001199802

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by ZHRO at 2013-07-24 07:09:08
怎么看2个ori是不是兼容的???可不可以先电一个做成感受态再电另外一个？？...

可以的，先电转一个，然后制感受态，再转第二个
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越学越无知
6楼2013-07-24 14:18:32
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hyphen007

金虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币-1, 应助指数-1, 违规存档, 如果不是应助的话请不要点击应助按钮，分子生物期待你的更多精彩谢谢理解 2013-07-24 16:44:24
同意2楼，主楼主顺利，呵呵
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7楼2013-07-24 16:35:59
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yandz680717

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
考虑复制子的兼容。pVLT33和pRK415就可以同时转入一个细胞
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8楼2013-07-24 16:49:54
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你要看一看2种质粒是否兼容 主要是看ori ,很多时候即使你的质粒转进去了 但是来种质粒不兼容 或者和原来的质粒不兼容，最后在复制过程中 转入的质粒可能丢失  建议楼主做一个穿梭质粒 或者看一看文献 是否帮你的2种质粒能够转入同一个细胞中。
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生命不息奋斗不止
9楼2013-07-27 11:43:49
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