应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 抑制差减杂交（SSH）的RNA纯化要求
51/1返回列表
查看: 1037  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lmcyjxs

金虫 (正式写手)

[求助] 抑制差减杂交（SSH）的RNA纯化要求

如题，我想做抑制差减杂交（SSH）发现空白与与处理组的差异基因。但是这个RNA要求就很高。我看过相关文献及使用说明书，知道它用量大，且质量要好。   
    但是关于RNA纯化这一块，在纯化得到mRNA之前，是否需要先用DNA消化酶消化掉DNA再去纯化mRNA比较好？如果提取得到总RNA后，直接过柱纯化得到mRNA，省掉消化DNA那步，会对mRNA的质量有很大影响吗？mRNA纯化，另外有无比较好的牌子推荐下呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
思路决定出路。。。
1楼 2013-07-22 16:45:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

哈啦啦2012

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主好！我最近也在做SSH，接头连接这块出现问题了，我买的试剂盒里没有做两次PCR需要的酶，我用SMART RACE试剂盒里的酶做，第一次PCR结果啥都没出来，接头连接效率也啥都没出来，好头疼啊，不知道是接头没连接上，还是酶的问题，用这个酶做普通的PCR能P出条带来。我酶切后纯化的ds cDNA检测了有条带啊。不知道到底哪里出问题了。希望能互相交流学习下吧。
赞一下 回复此楼
8楼2013-11-06 17:09:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

lmcyjxs

金虫 (正式写手)
★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流,静待高手来 2013-07-23 15:48:30
发现最近我发的帖子都没人回复的？
赞一下 回复此楼
思路决定出路。。。
2楼2013-07-23 14:32:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyphen007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lmcyjxs: 金币+2, ★有帮助, 总算有人回复了，谢谢。那有去总RNA中的DNA吗？其实，我是看到很多人都纯化了，但是另一方面想，纯化后，RNA的种类难免就会损失，因此纠结中。。。 2013-07-23 18:21:59
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-17 20:50:16
以前用总RNA都能做出来，不需要纯化出mRNA
赞一下 回复此楼
3楼2013-07-23 16:32:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyphen007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-17 20:50:02
哦，对了，还有就是貌似用kit提的RNA
赞一下 回复此楼
4楼2013-07-23 16:34:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭