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喵了个咪yaya新虫 (小有名气)
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[求助]
IFN-γ的PCR扩不出来，连梯度都做不出来
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求助各位大侠，我在做IFN-γ，在公司送来引物后连退火温度都P不出来。换了几次师姐做的模板，这是我自己最近一次提的模板，都弄不出。引物一共是3对，都没有弄出来，图上的是优化后的引物（用primer5设计的，各项指标见图，都是none，Oligo上则说是产物和引物退火温度差距过大，其他没有什么不对，见图）和文献中找的引物，TOUCHDOWN 也做过了，师姐也帮做过了，同学也帮做过，都没有p出来。求帮助找原因。 PCR图.PNG  2.PNG  3.PNG  IFN-γ-1.PNG  IFN-γ-1 BLAST.PNG  IFN-γ-2 BLAST.PNG [ Last edited by 喵了个咪yaya on 2013-7-17 at 15:18 ] |
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