24小时热门版块排行榜    

查看: 4455  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

herjasmine

新虫 (初入文坛)

[求助] 289KDa的蛋白的转膜条件

最近在做m-TOR蛋白(分子量是289KDa),做了两周了都做不出来。电泳是恒压100V,3h;转膜是恒流200mA,3h。每次转膜后不是没有marker了,就是做完了marker还在胶上(还有一次转膜完后发现maker在滤纸上了)。总之就是转膜时总有问题。有知道的同仁能给点好的建议吗?谢谢啦!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王耀晨01

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by herjasmine at 2013-07-17 09:46:09
谢谢你!我现在已经做出条带了,确实存在电流不稳定的情况,但我不确定之前做不出来是否与这有关。我现在的条件是转膜恒流300mA转140min。还是谢谢你!...

您好,我现在也要做m-TOR,请问您用的什么marker?Thermo货号为26625,,4-300kda的marker可以吗?转膜条件是什么?非常感谢,在线等。。
5楼2015-05-12 17:24:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

肃清华书

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, Gifts of roses, there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-07-15 10:59:12
转膜时候的电压调小一些吧,或者再加一些增强膜透性的物质,可能是因为电流不稳定。
2楼2013-07-15 07:45:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张力民1598

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。期待你的精彩和更详细的解答。 2013-07-15 10:59:26
感觉转膜时间有点短,延长时间试一下。

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2013-07-15 09:11:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

herjasmine

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 肃清华书 at 2013-07-15 07:45:45
转膜时候的电压调小一些吧,或者再加一些增强膜透性的物质,可能是因为电流不稳定。

谢谢你!我现在已经做出条带了,确实存在电流不稳定的情况,但我不确定之前做不出来是否与这有关。我现在的条件是转膜恒流300mA转140min。还是谢谢你!
4楼2013-07-17 09:46:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 14:24 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +5 gdd2018 2026-08-28 10/500 2026-08-29 14:10 by Jacob678
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 14:02 by jCd0dEvKHShX
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-29 13:41 by jCd0dEvKHShX
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 11:51 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +14 晴天加油 2026-08-26 15/750 2026-08-29 11:06 by biily
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +3 德尚中行 2026-08-27 3/150 2026-08-28 15:24 by rongshuxia
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见