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求助荧光倍频的问题
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| 在测试样品荧光时（固体的），会有倍频现象出现。除了将测量范围设置的躲过倍频峰的位置和加滤光片滤掉倍频外还有没有其他什么办法。我看文献上测的荧光图里发射范围里面包含它的激发所产生的倍频峰位置，可是得到的峰型还是很漂亮，没有倍频峰。请问这是后期处理数据时处理掉了还是用其他什么办法做到的呢？另外滤光片的滤光原理是啥啊，我只知道用上面标有大于激发光的波长值的滤光片就可以将倍频峰滤掉，具体也不知道为什么？求各位大牛解惑答疑，坐等高人~~~~~~ |
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guangdzhuh
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【答案】应助回帖
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wrahb: 金币+20, ★★★很有帮助 2013-07-17 10:08:08
wrahb: 金币+20, ★★★很有帮助 2013-07-17 10:08:08
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第一个问题，得到的峰应该不是荧光峰。滤光片不仅可以滤掉特定波长之前的峰，对该波长之后的光也会有一定的减弱作用，离得越近减弱越多。所以本应较平的基线会有一个上升过程。所以测试时一般激发光波长、滤光片波长、扫描范围开始的波长之间分别间隔15-20nm会比较好（视滤光片过滤能力而定）。对于第二个问题，应该可以处理掉（比如删掉或当做基线扣掉），有条件最好还是重测一遍，以免被人认为“数据造假”。 |
wrahb5楼2013-07-16 14:11:16
2楼2013-07-13 16:29:25
3楼2013-07-14 10:00:59
guangdzhuh
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感谢参与，应助指数 +1
wrahb: 金币+20, ★★★很有帮助, 非常感谢~~~我发现在加入滤光片后有时候会很明显的改变谱图，最明显的就是在扫描出峰的过程中一般都会从所加的滤光片上表明的波长处开始有一个很强的上升过程，然后再下降一点形成一个小峰。如果不加滤光片的话，就不会有这么一个峰存在。那它应该就不是样品本身的荧光峰吧~~~另外得到的包含倍频峰的数据在后期处理的时候，能否用origin等数据软件将其处理掉？谢谢 2013-07-16 09:37:28
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wrahb: 金币+20, ★★★很有帮助, 非常感谢~~~我发现在加入滤光片后有时候会很明显的改变谱图，最明显的就是在扫描出峰的过程中一般都会从所加的滤光片上表明的波长处开始有一个很强的上升过程，然后再下降一点形成一个小峰。如果不加滤光片的话，就不会有这么一个峰存在。那它应该就不是样品本身的荧光峰吧~~~另外得到的包含倍频峰的数据在后期处理的时候，能否用origin等数据软件将其处理掉？谢谢 2013-07-16 09:37:28
| 你加了波长大于激发光波长的滤光片后，就可以了，测试范围可以在滤光片的波长之后就行。倍频峰应该是在检测器上产生的。假设激发光为340nm,滤光片选用L38，意思就是可以把波长小于380nm的光滤掉，使其不能通过滤光片，这样激发光就不能通过滤光片，也就不会在检测器上形成倍频峰。样品发射的峰大于380nm的依然可以通过滤光片并被检测到，所以不受影响，也就是为什么扫描范围可以选择380nm--其它nm，扫描范围里面包含它的激发所产生的倍频峰位置，而不会有倍频峰。由于滤光片的过滤能力不一样，选用的时候可以多试试，选一个最优的。 |
4楼2013-07-14 17:19:21
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