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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA 提取 OD 260/230 值偏低
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zzjj_207

金虫 (小有名气)

[求助] RNA 提取 OD 260/230 值偏低

最近在用Bioline的试剂盒提取植物幼苗（包括根）的RNA。 提取的RNA的条带还可以（见附图），OD260/280都大于2.0， 但是OD260/230却小于1.8，有的甚至0.5~0.6，点样空附近可以看到一条模糊的带，是不是糖和盐类物质？怎么采取补救措施去除？求高手指点？
RNA 提取 OD 260/230 值偏低
图片4.jpg
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zzjj_207

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1楼 2013-07-11 09:52:28
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sls19881024

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by zzjj_207 at 2013-07-11 18:50:43
好的，我下次试试这样做
还有那我的胶孔附近的带是什么呢？不是DNA，因为我拍照后发现有带，我又放回去跑了10来分钟，还是没动，所以应该不是DNA，不知道是什么杂质？能不能去除？...

亲，我想问一下Bioline的产品好用吗？最近也有人向我们推荐Bioline的产品，价格挺贵的，不知道用后的效果怎么样?
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小松
15楼2015-11-16 19:17:27
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 很详细 2013-07-11 12:18:49
zzjj_207: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-07-15 09:42:24
我觉得你提的RNA不错了，比较完整。A260/230比较低可能是试剂中一些成分的污染，A260/280可以说明蛋白污染不多。你点样孔的暗带是蛋白核酸复合体。不知道你的RNA要做什么用，一般这样的样品可以直接用的，不用特别纠结A260/230。
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2楼2013-07-11 11:30:45
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zzjj_207

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-11 11:30:45
我觉得你提的RNA不错了，比较完整。A260/230比较低可能是试剂中一些成分的污染，A260/280可以说明蛋白污染不多。你点样孔的暗带是蛋白核酸复合体。不知道你的RNA要做什么用，一般这样的样品可以直接用的，不用特别纠 ...

谢谢回复，我后边要做测序，要求A260/230大于1.8，我是用的Bioline的Kit 提取的，可不可以按照步骤提完以后，最后再用70%的酒精再洗一次呢？不知道能不能去除那些杂质？
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3楼2013-07-11 12:29:19
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★
kx444555: 金币+2, 热心的版主 2013-07-11 14:44:11
amisking: 回帖置顶 2013-07-11 18:25:25
我也遇到过这种情况。260/230偏低可能是提取试剂的残留，或者乙醇没挥发干净，我碰到的是后者。当时解决的方法也就是尽量去除乙醇了。异丙醇沉淀RNA之后，加75%乙醇洗，洗完用蓝枪头把乙醇吸走，再短暂离心，用白枪头将残余的乙醇尽量吸干，然后等乙醇充分挥发后再加水溶解RNA。挥发乙醇时注意观察RNA沉淀块，沉淀块由白色变成半透明时乙醇就挥发得差不多了，此时加水比较合适。据说挥发时间太长，RNA水分很少时再溶解会很困难，不过我没遇见过。
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4楼2013-07-11 12:39:05
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