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1楼 2013-07-08 09:51:19

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darkarrow

新虫 (初入文坛)

BioEPI: 1
应助: 7 (幼儿园)
金币: 73.8
红花: 1
帖子: 28
在线: 5.9小时
虫号: 2324932
注册: 2013-03-06
专业: 蛋白质组学

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
137167741: 金币+2, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-09 08:18:41
silicare: BioEPI+1 2013-07-09 09:48:16

一般来说这种问题都是和抗体得质量有关。看你第一张图，第二条泳道像是control，因为只有非特异性得那一条带，说明你得抗体对于那个蛋白有更强得affinity，这样得话，再相同孵育得条件下，非特异性蛋白结合得抗体更多，所以显色得时候就非常轻易得就出信号，而你得目的条带信号弱，需要相对比较长得时间。你可以尝试这样做，先短曝光，小心得把信号强得那段相应得膜剪掉，然后用更长得时间来曝光你得目的条带。western得影响因素很多，重复不出来也很正常。对于western样品得制备，最好得办法就是直接往细胞里加上样buffer，这样得重复性会好些。

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浮帅古

6楼2013-07-09 03:33:07

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