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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 摇瓶初始pH灭完菌后，变化很大，有什么发放解决？
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crazy墨汁

新虫 (初入文坛)

[求助] 摇瓶初始pH灭完菌后，变化很大，有什么发放解决？

我本来打算做一下初始pH4-10的摇瓶实验，结果灭完菌后，pH变化很大，发酵培养基本来是偏酸性的，一般在4.5左右，上5L罐，pH调至6.8，灭完菌结果pH变化不大，如何使摇瓶的pH变化也不大呢？
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1楼 2013-07-02 23:14:14
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

flightty

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
摇瓶与发酵罐由于受热方式不同，灭菌效果会存在较大的差异。摇瓶培养基消毒偏酸的话可尝试碳源与氮源分消，再者就是楼上讲的加入碳酸钙，调前调后加影响并不大，但效果可能并不理想。有些培养基，初始培养基调到4-10这样广的范围，但消好后pH可能就在一个很小的范围内波动。若为了做实验，可以考虑添加生物缓冲液，如BIS。
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9楼2013-07-04 08:09:55
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
对于这种情况，我们一般采取两种方法：
第一，把初始PH值调高，具体调高多少，楼主可以做个梯度实验；
第二，往培养基中添加碳酸钙（我们加的浓度为0.1%),在培养的过程中碳酸钙在PH值变化中能很好的起到调节作用。
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希望大家多多交流。
10楼2013-07-04 08:48:39
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普通回帖

crazy墨汁

新虫 (初入文坛)
没有大神能够解答吗？？/
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2楼2013-07-03 14:11:46
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snqguang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
加入少量碳酸钙即可0.5%。
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3楼2013-07-03 16:04:08
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crazy墨汁

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by snqguang at 2013-07-03 16:04:08
加入少量碳酸钙即可0.5%。

pH5-10都可以加碳酸钙吗？那是先调pH还是先加碳酸钙？？？
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4楼2013-07-03 16:26:36
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2046xluc

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by crazy墨汁 at 2013-07-03 16:26:36
pH5-10都可以加碳酸钙吗？那是先调pH还是先加碳酸钙？？？...

先调pH再加碳酸钙。我们实验室是这个样。我在想为什么。。。
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5楼2013-07-03 16:32:14
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ljb19831120

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你可以将初始pH调高一点
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6楼2013-07-03 17:07:34
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
主要是要添加具有缓冲能力的离子，根据自己的实验情况和需求，添加弱酸或弱碱离子。
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7楼2013-07-03 18:45:46
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snqguang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by crazy墨汁 at 2013-07-03 16:26:36
pH5-10都可以加碳酸钙吗？那是先调pH还是先加碳酸钙？？？...

可以，先调PH后加碳酸钙，碳酸钙不溶于水，但可以适当的中和酸，当PH值下降时，会自动补充调节溶液里面的酸碱度的。
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8楼2013-07-04 07:58:18
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