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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 光谱分析 » 蛋白质荧光寿命
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lishuifanhua

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质荧光寿命

请问蛋白质比如牛血清，人血清白蛋白有两个荧光寿命，怎么算的的？一个时间分辨图怎么拟合算到两个寿命？
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1楼 2013-07-02 08:34:56
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liyincumt

金虫 (职业作家)

小学生
引用回帖:
3楼: Originally posted by lishuifanhua at 2013-07-05 10:51:32
用的是FLS-920稳态、瞬态荧光光谱仪测出来的，横坐标是时间，纵坐标是荧光光子数。...

那是时域法。随机软件上附带有荧光寿命计算功能。
2个荧光寿命拟合时，需要初猜四个参数,a1,tau1,a2,tau2，一般情况下a1+a2=1。计算公式如下,
I(t)=sum(a1*exp(t/tau1)+a2*exp(t/tau2))
1个荧光寿命拟合时，需要初猜1个参数tau1（a1=1），计算公式如下：
I(t)=a1*exp(t/tau1)
色氨酸的荧光寿命一般在3-5 ns之间，初猜时，可以给定这个范围内的值。对于HSA,只含有一个色氨酸，估计1个tau就够，BSA含有2个色氨酸，需要2个tau来拟合。
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千里之行，始于足下
4楼2013-07-05 16:01:33
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lishuifanhua

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liyincumt at 2013-07-04 21:35:27
你是用的频域的方法还是时域的方法得到的时间分辨图谱？计算原理主要是根据荧光的指数衰变理论，结合非线性最小二乘法所得到。一般荧光软件上都有自带的计算寿命的功能。如果你是频域法，推荐一个网站，可以下载到免 ...

用的是FLS-920稳态、瞬态荧光光谱仪测出来的，横坐标是时间，纵坐标是荧光光子数。
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3楼2013-07-05 10:51:32
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lishuifanhua

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liyincumt at 2013-07-05 16:01:33
那是时域法。随机软件上附带有荧光寿命计算功能。
2个荧光寿命拟合时，需要初猜四个参数,a1,tau1,a2,tau2，一般情况下a1+a2=1。计算公式如下,
I(t)=sum(a1*exp(t/tau1)+a2*exp(t/tau2))
1个荧光寿命拟合时，需要 ...

非常感谢，请问能不能用origin拟合两个寿命的呢？
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5楼2013-07-07 07:51:44
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