2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-28 00:22:03
你用的是0.2还是0.1的杯子？1100V是不是低了些？细菌一般都是2500V的。

3楼: Originally posted by 499649610 at 2013-07-02 14:40:11
0.2的...

4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-02 23:53:58
对你用的宿主不是很清楚。一般做电转化是在给完电激后应立即加入培养液复苏，否则会有很多死亡的。三亲接合转化主要是宿主的生长状态，菌不宜太老。接合质粒菌和helper菌最好是用过夜培养的菌液活化后使用。离心和 ...

5楼: Originally posted by 499649610 at 2013-07-03 21:28:44
谢！我质粒的宿主菌是大肠杆菌CC118，要转到野生型菌菊欧文氏杆菌中间去。质粒为PKNG。菊欧文氏菌生长速度较慢，我一般是第一天中午就活化它，然后大肠杆菌是过夜培养。我把三种菌在平板上划得很密，然后用接种环刮 ...

6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-03 23:01:09
我做三亲转移的时候，宿主菌和大肠杆菌都是液体培养。大肠杆菌液体培养过夜后第二天再用液体活化至对数期。离心后用无抗的LB重悬，把这两个菌1:1混合后再与宿主菌混合，宿主菌做三个稀释梯度。然后涂板。...

7楼: Originally posted by 499649610 at 2013-07-04 19:24:37
我也有试过液体培养 但是 也是一样的效果...