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zhiqiang5070

木虫 (正式写手)

[求助] 做间接竞争Elisa遇到了问题,有懂的朋友帮帮

现在在用间接竞争Elisa测定某海洋动物各组织的某种蛋白的表达量,标准曲线已经建立,可是在实际测量组织蛋白含量时却出现了问题。情况如下:利用试剂盒提取组织的总蛋白(全程无灭菌),然后将总蛋白稀释10倍用于Elisa。每次Elisa都跟有标准曲线,每孔分别是50 μ的抗原,50 μ的一抗,其他的不一一说了。
   
    每次做完,跟的标准曲线都比较正常,但是测出来的蛋白量几乎都一样(组织是经过不同处理的,real-time结果和酶活性测定结果(是种酶)都随着不同处理而显著变化)。有没有朋友遇到过这种情况,求经验。
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