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ttxs99

木虫 (小有名气)

[求助] 求助~~~~~~~~~~关于miRNA真核表达载体~~~~~~~

小妹在构建miRNA真核表达载体时出现了很多疑问,望各位大神解救。。。
1.miRNA的序列用哪个呢?
在构建miRNA真核表达载体时,有的用pre-miRNA序列,有的用pri-miRNA序列,还有的用pre-miRNA序列+两端的侧翼序列。
2.用哪种方法获得目的序列了?
方法有传统的扩基因组得到序列的,也有合成之后退火获得序列的。在序列选取和引物设计上有什么需要注意的呢?
3.载体太多,不知道怎么选,看文章发现大多都是用的不同的载体。既然都是构建超表达载体,是不是只要是超表达载体就OK呢?
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淡定
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