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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 根肿病原菌毒素提取
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傲骨之梅

金虫 (小有名气)

[求助] 根肿病原菌毒素提取

有哪位师兄师姐提取过根肿菌毒素，可以指点一下吗？

[ Last edited by 傲骨之梅 on 2013-6-20 at 21:23 ]
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生命不息，奋斗不止！
1楼 2013-06-20 21:00:00
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赵景楠1991

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 傲骨之梅 at 2013-06-25 18:19:16
可是植物根肿菌不能离题培养啊？...

首先在植株上接种病原菌，按照自己病原菌的发病情况采取患病组织，清水冲洗，自然晾干，剪成小段，加适量蒸馏水冷冻24h，取出加少量蒸馏水在匀浆机上进行匀浆（10000-12000r/min）充分粉碎，用纱布粗过滤，在用滤纸进行抽真空，得病菌的毒素粗提液。
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4楼2013-06-26 09:01:57
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赵景楠1991

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

用直径为8mm的打孔器在活化5d后病原菌的菌落边缘打取菌片，每个装有150mLPD培养液的250ml三角瓶中接种4菌片，120r/min、25℃下在恒温振荡培养箱中振荡培养，15d后将发酵液用4层纱布过滤，滤液经10000rpm，30min离心后，取上清液用0.22μm细菌过滤器进行抽滤，得到病菌毒素滤液。
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2楼2013-06-25 08:51:05
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傲骨之梅

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 赵景楠1991 at 2013-06-25 08:51:05
用直径为8mm的打孔器在活化5d后病原菌的菌落边缘打取菌片，每个装有150mLPD培养液的250ml三角瓶中接种4菌片，120r/min、25℃下在恒温振荡培养箱中振荡培养，15d后将发酵液用4层纱布过滤，滤液经10000rpm，30min离心 ...

可是植物根肿菌不能离题培养啊？
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生命不息，奋斗不止！
3楼2013-06-25 18:19:16
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傲骨之梅

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 赵景楠1991 at 2013-06-26 09:01:57
首先在植株上接种病原菌，按照自己病原菌的发病情况采取患病组织，清水冲洗，自然晾干，剪成小段，加适量蒸馏水冷冻24h，取出加少量蒸馏水在匀浆机上进行匀浆（10000-12000r/min）充分粉碎，用纱布粗过滤，在用滤纸 ...

可以把病原菌过滤掉吗？只研究毒素的话不能有病原菌孢子的干扰。
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生命不息，奋斗不止！
5楼2013-06-26 11:04:39
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