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傲骨之梅

金虫 (小有名气)

[求助] 根肿病原菌毒素提取

有哪位师兄师姐提取过根肿菌毒素,可以指点一下吗?

[ Last edited by 傲骨之梅 on 2013-6-20 at 21:23 ]
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赵景楠1991

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

用直径为8mm的打孔器在活化5d后病原菌的菌落边缘打取菌片,每个装有150mLPD培养液的250ml三角瓶中接种4菌片,120r/min、25℃下在恒温振荡培养箱中振荡培养,15d后将发酵液用4层纱布过滤,滤液经10000rpm,30min离心后,取上清液用0.22μm细菌过滤器进行抽滤,得到病菌毒素滤液。
2楼2013-06-25 08:51:05
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傲骨之梅

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 赵景楠1991 at 2013-06-25 08:51:05
用直径为8mm的打孔器在活化5d后病原菌的菌落边缘打取菌片,每个装有150mLPD培养液的250ml三角瓶中接种4菌片,120r/min、25℃下在恒温振荡培养箱中振荡培养,15d后将发酵液用4层纱布过滤,滤液经10000rpm,30min离心 ...

可是植物根肿菌不能离题培养啊?
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3楼2013-06-25 18:19:16
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赵景楠1991

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 傲骨之梅 at 2013-06-25 18:19:16
可是植物根肿菌不能离题培养啊?...

首先在植株上接种病原菌,按照自己病原菌的发病情况采取患病组织,清水冲洗,自然晾干,剪成小段,加适量蒸馏水冷冻24h,取出加少量蒸馏水在匀浆机上进行匀浆(10000-12000r/min)充分粉碎,用纱布粗过滤,在用滤纸进行抽真空,得病菌的毒素粗提液。
4楼2013-06-26 09:01:57
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傲骨之梅

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 赵景楠1991 at 2013-06-26 09:01:57
首先在植株上接种病原菌,按照自己病原菌的发病情况采取患病组织,清水冲洗,自然晾干,剪成小段,加适量蒸馏水冷冻24h,取出加少量蒸馏水在匀浆机上进行匀浆(10000-12000r/min)充分粉碎,用纱布粗过滤,在用滤纸 ...

可以把病原菌过滤掉吗?只研究毒素的话不能有病原菌孢子的干扰。
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5楼2013-06-26 11:04:39
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赵景楠1991

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 傲骨之梅 at 2013-06-26 11:04:39
可以把病原菌过滤掉吗?只研究毒素的话不能有病原菌孢子的干扰。...

是的。
6楼2013-06-26 11:29:03
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傲骨之梅

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 赵景楠1991 at 2013-06-26 11:29:03
是的。...

麻烦再问一下师兄(或师姐)有相关文献吗?可否跟我说一下
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7楼2013-06-26 21:46:46
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赵景楠1991

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 傲骨之梅 at 2013-06-26 21:46:46
麻烦再问一下师兄(或师姐)有相关文献吗?可否跟我说一下...

你可以参考一下陈捷主编的《现代植物病理学研究方法》中活体内植物病原菌的分离这一部分。
8楼2013-06-27 08:42:32
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傲骨之梅

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 赵景楠1991 at 2013-06-27 08:42:32
你可以参考一下陈捷主编的《现代植物病理学研究方法》中活体内植物病原菌的分离这一部分。...

哦,谢谢师兄(或师姐)!
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9楼2013-06-27 09:09:02
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