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janelss

铁虫 (初入文坛)

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[求助] 强阴离子交换柱，流穿问题

我的目标蛋白质PI是7.0 用强阴离子交换柱，缓冲液PH=8.5，无论怎么做，目标蛋白质总是出现在流穿中，操作，溶液什么的都没有问题，这是为什么。

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1楼2013-06-17 09:31:41

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ynkuaile

木虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

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janelss: 金币+20, ★★★很有帮助 2013-06-21 09:07:53

2楼第一句话就问上样盐浓度多少。你该考虑一下的。另外，你说你的蛋白是血红素蛋白，那么这个颜色就是铁卟啉被氧化后的颜色。这个还是别除去的好。强阴不是特别好洗脱，但是一个梯度，如果出峰时盐浓度很高，换弱的也可以，关键是强阴的都不结合，为何还推荐用弱阴的呢？谁能解小弟疑惑呢？（强阴离子交换柱，缓冲液PH=8.5，无论怎么做，目标蛋白质总是出现在流穿中）。强阴不结合，推荐用弱阴？
阴离子柱，能吸附负电的东西，卟啉环感觉应该能与阴离子柱作用吧，如果是这样，可能会将蛋白与辅基分开，这是不好的结果，当然，这是我的想法，是否会这样要看实验，愿做过类似的能告知一下，是否会脱辅基。