24小时热门版块排行榜    

查看: 880  |  回复: 4

崔永霞

铁虫 (小有名气)

[求助] 胶回收

我这几天在做从凝胶中回收DNA试验,可是在紫外下检测没有条带,什么都没回收到,这是什么原因啊?我是按照试验试剂盒的操作流程一步步来的,实在找不到是什么原因了,麻烦大家帮我分析一下吧。!
回复此楼
每个人都有心底最柔软的地方,请不要触碰它,因为每个人都有自己的尊严!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

byang0904

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖应助! 2013-06-16 20:57:30
如果你确定是加了EB的话,那么最可能的就是你pcr没扩增出来条带,可能是引物的问题
2楼2013-06-16 20:00:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张力民1598

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是先将目的条带切下来后进行的胶回收吧?切胶的时候亮度如何?如果量比较少的话,再加上回收过程中会损失一些,导致回收到的DNA很少。
3楼2013-06-16 21:13:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

德国工兵铲

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是没有回收到,切快点,凉了之后再过柱,嗯,硅胶膜低PH高盐条件下吸附DNA效果好,所以有一步怕溶液PH过高,可以添加醋酸钠
4楼2013-06-16 21:14:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lmcyjxs

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先,保证回收量够,我以前用45微升PCR产物回收的,回收后可用琼脂糖凝胶电泳检测。
其次, 切胶不要切偏,保证切到目的片段而不附带多余胶,不要在紫外下暴露太长时间,熔胶要均匀,彻底熔融。
再次,试剂盒是否有效?你要看清楚,有些试剂要自行加乙醇或混匀的,别漏了哦
最后,电泳无条带不一定你没回收到,可能量太少,你回收看用途是什么,例如用于克隆连接,量很少就行。
望对你有用!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
思路决定出路。。。
5楼2013-06-16 21:46:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 崔永霞 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:23 by o3EMxHUAQDtS
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:22 by o3EMxHUAQDtS
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:14 by o3EMxHUAQDtS
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 5/250 2026-08-31 14:40 by hahaboy
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
请填处理意见