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路易斯

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于细胞染菌的问题

【求助】 现在天气热了,养细胞容易染菌,最近在医院和市场上买不到链霉素了,所以最近配得培养基没有加双抗,最近细胞一直在染菌,就加了几微升环丙沙星,我想做抗肿瘤方面的实验和Western blot实验,环丙沙星可以作用于细菌细胞DNA螺旋酶的A亚单位,抑制DNA的合成和复制而导致细菌死亡。
  请问,环丙沙星对肿瘤细胞有影响吗?对蛋白含量的检测有影响吗?如果再次换液不加环丙沙星的话,培养瓶里又长黑胶虫了
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wkh310

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1、培养基里面应该适当的添加双抗,主要为了防止染菌蔓延;
2、培养过程中你觉得操作没有什么问题,加环丙沙星,黑胶虫可以死掉,不加的话继续繁殖生长,我们平时是加1%的环丙沙星;
3、其实黑胶虫有好多种说法,你可以再高倍显微镜下观察是不是培养瓶上面本身的黑点,还有每次传的细胞应该换液,这样不行的话,你可以用琼脂板检测,动的话应该就是黑胶虫,不动的话应该就不是,可能是其他原因培养基、培养瓶等等现象;
希望对你有帮助,一起讨论,一起学习
5楼2013-06-20 10:28:03
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zzjcust

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
环丙沙星对细胞的影响,主要看你是那种细胞吧,一般来说是要是人的细胞因该没事,
2楼2013-06-17 11:57:27
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superwheat

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
市场上有很多细胞培养用的100x双抗卖啊,进口的像hyclone, invitrogen, cellgro, 国产的像什么碧云天之类的,也不贵。

其实养成良好的细胞无菌操作习惯,不加抗生素完全没问题的。我以前做细胞培养的时候一直不用双抗的
3楼2013-06-17 12:13:44
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路易斯

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by superwheat at 2013-06-17 12:13:44
市场上有很多细胞培养用的100x双抗卖啊,进口的像hyclone, invitrogen, cellgro, 国产的像什么碧云天之类的,也不贵。

其实养成良好的细胞无菌操作习惯,不加抗生素完全没问题的。我以前做细胞培养的时候一直不 ...

操作上没有什么问题,打听了一下,我那人肝癌细胞长的是黑胶虫,加上环丙沙星,那些虫子死光光了,如果不加的话,还会继续长虫子的。
4楼2013-06-17 17:04:47
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