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自己设计RNA建库用index primer(illumina)PCR扩增效率低
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针对RNA-seq,illumina官方公布的是24种index序列,实验室用的是NEB的RNA建库试剂盒,里面也只有24种index,现在这些index不够用,所以实验室自己合成了两个index primer(序列是根据small RNA建库试剂盒的index设计的)。 用同样的样本建库,在最后PCR扩增时比较试剂盒index和自合成index primer的扩增效率,发现自合成index primer的扩增效率总是很低,实验方法都一样,只是6个碱基的差别(index序列),为什么自合成index primer扩增总是低呢? [ Last edited by gwzjiayou on 2013-6-14 at 15:18 ] |
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gaoyang636
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