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夏沐浅

新虫 (小有名气)

引用回帖:
20楼: Originally posted by rv1nm2y at 2013-06-25 11:25:35
我们今天又做了一次,昨天就配好了,也凝了,放在冰箱冻了一晚上,结果今天做的结果真是惨不忍睹,现在正在染色,不知道效果会不会惨不忍睹。。

条带在浓缩胶那是以一条线的,结果到了分离胶就有点斜了,还有一 ...

你还放冰箱了?我之前都是直接在室温放了一晚上,第二天早上直接用的,变化不是很大。
我做得比较郁闷的是条带分辨率太低了,两边有点拖尾,一直在找原因。
清浅
21楼2013-06-25 14:21:43
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


137167741: 金币+1, 鼓励交流~~ 2013-06-26 18:29:48
引用回帖:
18楼: Originally posted by 夏沐浅 at 2013-06-25 09:50:58
我的凝胶速度蛮快的,就是有时候放的时间较长,这个影响大吗?...

放时间长你指多久?一般不马上跑的话最好只做分离胶,因为浓缩胶的pH与分离胶不同,长时间保存可能会有扩散问题。此外,有时候浓缩胶凝时间长了胶孔可能变得不整齐。
22楼2013-06-26 02:30:02
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夏沐浅

新虫 (小有名气)

引用回帖:
22楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-26 02:30:02
放时间长你指多久?一般不马上跑的话最好只做分离胶,因为浓缩胶的pH与分离胶不同,长时间保存可能会有扩散问题。此外,有时候浓缩胶凝时间长了胶孔可能变得不整齐。...

那分离胶凝得很慢怎么回事?APS是现配的,应该是ACR-BIS的问题,但是我配的是29.2gACR+0.8gBIS定容100ml,4℃棕色瓶保存的,这有什么问题吗?
清浅
23楼2013-06-26 09:47:51
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-06-26 18:29:55
引用回帖:
23楼: Originally posted by 夏沐浅 at 2013-06-26 09:47:51
那分离胶凝得很慢怎么回事?APS是现配的,应该是ACR-BIS的问题,但是我配的是29.2gACR+0.8gBIS定容100ml,4℃棕色瓶保存的,这有什么问题吗?...

不知道你说的很慢是多慢,凝得太快也不好。不知道你的配方是加多少APS和TEMED。一般分离胶在1小时左右凝好比较合适。胶凝的速度和实验室的温度也有一定关系。一般APS新鲜配制当然最好,不过也可以配成10%的母液分装成小管保存在-20°C。要注意的是APS容易过期变质,如果你发现固体有潮糊糊的感觉,可能是APS失效了。PS: 你的凝胶母液的配方没有问题。
24楼2013-06-26 13:58:45
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