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SDS-PAGE结果求分析原因
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跑的是marker蛋白，12%的分离胶，没有浓缩胶，跑着呈倒梯形，而且一共有十种蛋白的，我的出来了8条，15mA的电流，电压开始只有60V，而且83*73*1的胶跑了1：40，时间也这么长，这个是怎么回事啊？ 上面的图是考染之后的，下面的是跑完之后拍的，  SDS-PAGE自制胶 zlp 2013-06-06.jpg  P6069319.JPG |
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cicelyzh
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22楼2013-06-26 02:30:02
cicelyzh
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【答案】应助回帖
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夏沐浅: 金币+5, ★有帮助 2013-06-08 13:56:42
| 我觉得你的marker跑成这样算是不错的了。呈倒梯形主要可能是因为你只点了marker。如果在两边的空白泳道上点与marker同样体积的上样buffer来保持一下压力，应该可以解决这个问题。至于缺两条带的问题，问一下缺的什么分子量的带？12%的胶上对有些分子量的蛋白可能分离效果差，跑不出来的。关于电压电流的问题，你设置的是稳压还是稳流跑？如果是稳流，需要把电压调高到200V以上，刚开始的时候电压比较低，60V也算是正常的，随着电泳过程电压会逐渐升高的。跑1小时40分不是很久，根据你设置的电流，一般小胶差不多是这个时间。 |
2楼2013-06-08 00:27:33
3楼2013-06-08 14:00:48
cicelyzh
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4楼2013-06-08 23:51:17