10楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-17 09:58:36
这个胶也有一定问题，条带从上而下有些变宽。我不知道你的marker是哪个公司的，怎么做的预处理。我是把处理好的marker稀释到与样品同样体积的loading buffer里。跑出来的带是上下一样宽。...

11楼: Originally posted by 夏沐浅 at 2013-06-18 15:43:53
marker都是直接混在上样缓冲液里面，然后就跑电泳的，需要怎么预处理吗？
还有如果没有浓缩胶的话，这种情况跑出来会不会影响很大？...

12楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-19 00:50:38
marker怎样处理要看你买是是什么产品。有些marker可以直接跑电泳，有些需要自己做变性处理。有浓缩胶的话条带应该更漂亮。但如果上样量不大的话没有浓缩胶也是可以的。...

13楼: Originally posted by 夏沐浅 at 2013-06-19 10:06:28
marker是伯乐的
但是这主要还是胶的问题，同样的上样，同样的蛋白，结果不一样的话，只能是胶了，因为要非常好的条带，不知道制胶的过程有什么细节，或者处理下可以更好的。...

14楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-19 11:29:52
想要重复性好主要是制胶的配方和过程尽量保持一致。胶凝的速度过快或者过慢都可能影响胶的质量和均一程度。...

15楼: Originally posted by 夏沐浅 at 2013-06-21 19:52:01
太慢也有影响？我之前有时候放过一晚上
你们一般C%都是多少？...

16楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-21 23:42:18
胶凝得慢当然问题不是很大，不过一般都不超过2小时。凝胶的快慢会受到环境温度和APS的影响，有时候需要根据实际情况稍微调整一下APS的用量。如果凝得时间不同，可能胶的质量会有些差别。我跑SDS-PAGE的丙烯酰胺溶液 ...

17楼: Originally posted by rv1nm2y at 2013-06-23 19:08:14
真心感觉是胶的问题啊，我们最近也跑了一次，浓缩胶就有问题（放置了好几天，有时也在室温），根本没办法浓缩成一个条带，到了分离胶那，也是上面挺均匀，下面就歪七扭八的了， 还是保存好胶吧，灌胶的操作也挺重要 ...

19楼: Originally posted by 夏沐浅 at 2013-06-25 09:53:23
我做了好多次了···
我也觉得是胶的问题，就是还没找到问题出在那儿
凝好的胶你们都怎么保存的？灌胶不是只要没气泡就可以了么？还有什么特别的要求？...