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吃面包

金虫 (初入文坛)

[求助] 植物叶片硝酸还原酶活性测定中测试样吸光值比对照低,是什么原因

用 李合生主编.植物生理生化实验原理和技术.2000. 中的离体法测植物叶片硝酸还原酶活性,测试样(加NADH)吸光值总是低于对照(不加NADH,用pH 7.5的磷酸缓冲液代替)是什么原因?测试样和对照吸光值在0.1左右都偏低,差值在0.07左右。
配制试剂时EDTA用EDTA-Na代替,NADH用NADH-Na2代替了,其他都和实验指导书上一样。
做了几次都是这样的情况,望高手指点,急。。。
非常感谢。。
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小虫来了,加油!
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13436

新虫 (初入文坛)

★ ★
lqf808: 金币+2, 应该当天配当天测。 2014-07-20 21:16:35
同样结果,到目前为止做了五次实验都是对照高于实验组,看到一个方法上的注意事项写着:配好的KNO 3 磷酸缓冲液应密闭低温保存,否则易滋生微生物将NO 3- 还原,使对照吸光值偏高。http://www.biomart.cn/experiment/430/574/575/578/21861.htm。昨天做了一遍低温保存,依然对照高于实验组。还未找到原因,望与楼主和2楼沟通,探讨。
@taojia7560   @吃面包
3楼2014-04-14 09:17:41
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taojia7560

木虫 (正式写手)

请问楼主问题解决没有,最近也在测,同样的问题

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
平凡
2楼2013-10-02 08:49:36
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alito

金虫 (小有名气)

同求,昨天做的还没问题。今天就一堆比对照低的。最后用水做的对照。想在用实验中的对照跟水比一下。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2014-07-17 19:01:18
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lqf808

至尊木虫 (著名写手)

都市农夫

昨天做的还没问题,今天就一堆比对照低的。
说明配好的KNO 3 磷酸缓冲液应密闭低温保存,否则24h后易滋生微生物将NO 3- 还原,使对照吸光值偏高.
应该当天配当天测。
5楼2014-07-20 21:15:51
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