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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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dshlove

木虫 (正式写手)

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9楼: Originally posted by 天叶之羽 at 2013-06-09 21:31:51
你说的是那种用在离心管里的浓缩管么??我问的是那种超滤仪。。不过都木有用过。。...

对,那种用在离心管里的浓缩管就是MILLIPORE的比较好的,使用很简单。
11楼2013-06-13 08:55:47
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天叶之羽

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by dshlove at 2013-06-13 08:55:47
对,那种用在离心管里的浓缩管就是MILLIPORE的比较好的,使用很简单。...

enen,,但是好像每次处理量有点小,,我正在打算购买超滤膜包。。改用超滤浓缩。。硫酸铵沉淀太费劲了……
12楼2013-06-13 18:17:44
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dshlove

木虫 (正式写手)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 天叶之羽 at 2013-06-13 18:17:44
enen,,但是好像每次处理量有点小,,我正在打算购买超滤膜包。。改用超滤浓缩。。硫酸铵沉淀太费劲了……...

说实话,小体积的话硫酸铵沉淀还是比较划算的。大体积的我们一般用切向流过滤先处理后再进行后续处理。
13楼2013-06-14 09:12:01
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hahamei2008

银虫 (初入文坛)

我做过类似的实验,你首先的摸硫酸铵的浓度,看看多大浓度下目的蛋白会沉淀,然后再用你的buffer将沉淀下来的蛋白溶解,可以加适量的DOC(脱氧胆酸钠),在跑胶看看效果。
加油
14楼2013-06-14 15:39:16
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天叶之羽

新虫 (初入文坛)

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13楼: Originally posted by dshlove at 2013-06-14 09:12:01
说实话,小体积的话硫酸铵沉淀还是比较划算的。大体积的我们一般用切向流过滤先处理后再进行后续处理。...

一般要处理1L以上,感觉加硫酸铵有点难以操作了。我用100mL做预实验的时候80%的都加了半个小时。
15楼2013-06-17 09:19:20
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天叶之羽

新虫 (初入文坛)

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14楼: Originally posted by hahamei2008 at 2013-06-14 15:39:16
我做过类似的实验,你首先的摸硫酸铵的浓度,看看多大浓度下目的蛋白会沉淀,然后再用你的buffer将沉淀下来的蛋白溶解,可以加适量的DOC(脱氧胆酸钠),在跑胶看看效果。

这个摸浓度的已经操作过了,但是大部分目的蛋白还是留在上清液里,很难被沉淀下来。
16楼2013-06-17 09:20:42
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dshlove

木虫 (正式写手)

引用回帖:
15楼: Originally posted by 天叶之羽 at 2013-06-17 09:19:20
一般要处理1L以上,感觉加硫酸铵有点难以操作了。我用100mL做预实验的时候80%的都加了半个小时。...

嗯,我以前用饱和硫酸铵,用蠕动泵滴加,不用一直看着。
17楼2013-06-17 12:15:26
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天叶之羽

新虫 (初入文坛)

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17楼: Originally posted by dshlove at 2013-06-17 12:15:26
嗯,我以前用饱和硫酸铵,用蠕动泵滴加,不用一直看着。...

硫酸铵浓度大的话,,配成液体滴加会增加样品的体积,,这个问题要怎样解决好呢
18楼2013-06-30 10:11:20
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dshlove

木虫 (正式写手)

引用回帖:
18楼: Originally posted by 天叶之羽 at 2013-06-30 10:11:20
硫酸铵浓度大的话,,配成液体滴加会增加样品的体积,,这个问题要怎样解决好呢...

那样的话,你就要算上滴加液体的体积了。
19楼2013-06-30 12:06:20
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