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echochen1017新虫 (初入文坛)
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提质粒酶切
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1、从BL21-pET28a-gene中提取质粒,有的提不出来,然后对提出来的酶切,pET28a居然在一个小时左右被切碎(电泳无条带,只有瀑布状的东西)。 2、将目的基因与pET28a连接,转化入BL21中,抗性筛选出菌落,培养,蛋白表达(量少,基本不表达),酶活检测,对底物具有活性,且重复三次结果一致,呈现质粒构建成功的状态,但是提质粒后,却没有条带,求大神解答!! |
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echochen1017
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