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风诺2010

铜虫 (小有名气)

[求助] RNAi表达载体构建后,酶切切不开,怎么回事?

我有3个目的片段,分别在800,700和500左右,采用一步法与表达载体pBI-121植物表达载体连接,没有采用构建中间载体的方法, 但是我想这也不影响我的酶切吧,我用PCR检测都有结果,PCR结果都显示3个片段都连上了,但是就是酶切切不了,用同样的酶切其他的质粒都能切开,就是切这个RNAi表达载体切不了,怎么回事,求大侠指点。之后再加50金币。跪求。。。。。。。
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治愈系柠檬茶

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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风诺2010: 金币+5 2013-06-30 17:09:25
先改用其他的酶切位点试一试 如果能切开就是内切酶的问题,不是体系不对就是位点突变,如果切不开就是你的质粒样品的问题,样品蛋白太多也会影响酶切
5楼2013-06-08 17:08:00
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