应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于taq酶的弱弱的问题，抱大腿球解答……
231/3返回列表123下一页
查看: 2088  |  回复: 22
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xxx幽冥

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于taq酶的弱弱的问题，抱大腿球解答……

今天刚做完限选课实验，提取植物DNA，然后PCR，电泳全军覆没，没出DNA条带……做的时候，一堆人手忙脚乱往PCR管里加东西，老师说我们失败的原因是PCR管子在手里攥太久了，没放冰浴里面，taq酶比较娇气，失活了，但是好奇怪啊，它不是耐高温的么，怎么室温一会就失活了呢？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-05-31 19:17:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xxx幽冥(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-31 23:19:03
taq酶一点也不娇气，外面放几天都没事的，还在乎你手里攥会，我觉得这个不是失败的原因。
赞一下 回复此楼
2楼2013-05-31 19:38:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alarace

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xxx幽冥(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-31 23:19:14
“一堆人手忙脚乱往PCR管里加东西”这才是原因吧。
赞一下 回复此楼
3楼2013-05-31 20:38:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xxx幽冥(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-01 14:59:28
taq酶不会这么容易失活。只是在任何温度下都有活性，不在冰上混样品容易有非特异扩增和引物二聚体。我觉得可能是体系里面什么东西忘记加或者加错了。
赞一下 回复此楼
4楼2013-06-01 04:39:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

porphybaby

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是不是引物 还是 模板 忘了加？

另外你有没有确定DNA提取成功？
赞一下 回复此楼
5楼2013-06-01 11:30:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xxx幽冥(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-01 14:59:38
那么多人，污染严重了吧。
反正这不是人多能办成的事。
我做的时候带手套，穿白大褂，带帽子，带口罩。
赞一下 回复此楼
6楼2013-06-01 14:15:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhoulubin

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xxx幽冥(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-01 14:59:49
先看DNA电泳有没有条带，确定是否PCR没东西是否由模板造成。
Taq酶还好，我放4℃几个月都没事
人多可能加错样，这是主要的
也有可能是跑电泳出了问题
不能单纯说是Taq酶的问题，看来老师不专业呀
赞一下 回复此楼
每个年龄都有其最应该做的事，但只有过了那个年龄自己才知道
7楼2013-06-01 14:33:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

泪花雨水

新虫 (初入文坛)
★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-03 18:22:53
手攥手里失活的可能性是非常小的，应该是PCR 反应体系加的时候有问题，人多手忙脚乱很容易少加或错加，不过还是建议以后最后加酶，这样加样过程中不用放冰上，也不必担心酶失活
赞一下 回复此楼
8楼2013-06-01 18:00:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xxx幽冥

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by q317476148 at 2013-06-01 14:15:50
那么多人，污染严重了吧。
反正这不是人多能办成的事。
我做的时候带手套，穿白大褂，带帽子，带口罩。

10个组，本科生实验你懂的
赞一下 回复此楼
9楼2013-06-01 18:41:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

songzuowei

木虫 (著名写手)
这个PCR P不出来很正常的 影响因素太多了 把原因归结到Tag酶失活上就有点扯了
赞一下 回复此楼
10楼2013-06-01 18:48:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xxx幽冥 的主题更新
231/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 l7k6xnh0yc 2026-05-14 3/150 2026-05-16 01:49 by k37jurhrau
[考博] 2026博士还有哪些学校有名额 +3 小王求读研 2026-05-15 4/200 2026-05-16 01:01 by 小田6699
[文学芳草园] 窗边初夏的小雨 +8 阿美_Lml888 2026-05-09 11/550 2026-05-15 23:54 by WASM
[文学芳草园] 裁员滚滚，退居二线 +3 J_wei 2026-05-10 3/150 2026-05-15 22:52 by molecula
[论文投稿] 有带发论文的吗 +4 山楂之术 2026-05-09 4/200 2026-05-15 15:40 by 妹子不好惹
[文学芳草园] 风把牡丹吹跑了 +5 myrtle 2026-05-12 9/450 2026-05-15 15:27 by myrtle
[基金申请] 精华III:  评审感受-评审感受-评审感受 +14 ferrarichen 2026-05-11 18/900 2026-05-15 11:12 by cmhchen
[基金申请] 这年头没有找到涵评专家，还有中面上的可能吗 +9 dd921ww 2026-05-12 10/500 2026-05-15 10:41 by muyiliuhui
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 l7k6xnh0yc 2026-05-14 3/150 2026-05-15 09:23 by onwj4wpxp2
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 cjf4bx70cj 2026-05-14 4/200 2026-05-15 09:03 by gagyerk94e
[教师之家] 教学课件你会给同学吗 +8 硕士研究生吗 2026-05-13 8/400 2026-05-14 22:23 by 常规沥青
[考博] 26应届毕业生考博求助 +3 wo一定上岸 2026-05-13 3/150 2026-05-14 21:47 by 明海天涯
[基金申请] 重磅！青年科学基金项目（C类）资助增幅预计超过50% +5 水和泥不是水泥 2026-05-13 7/350 2026-05-14 20:57 by 水和泥不是水泥
[有机交流] 求助2，4-二氯-5-嘧啶甲醛的合成方法 20+3 光吃不拉 2026-05-14 5/250 2026-05-14 20:15 by 一切都是空工
[高分子] 本人最近太闲了，谁有问题可以提，每天会统一回复 +8 一切都是空工 2026-05-12 19/950 2026-05-14 20:03 by 一切都是空工
[考博] 申博自荐 +4 食品的橙子 2026-05-09 6/300 2026-05-14 16:05 by great1919
[基金申请] 请问大佬b0816评完了吗 +3 市民华南虎 2026-05-12 7/350 2026-05-14 07:41 by 市民华南虎
[硕博家园] 导师各种操作恶心咋办 +11 苍白的小青天 2026-05-09 13/650 2026-05-13 17:11 by 六两废铜
[论文投稿] 求助大佬sci投稿哪个好中 +3 江沅188 2026-05-12 4/200 2026-05-13 14:35 by 江沅188
[考博] 现在不知道怎么办，感觉很痛苦 +4 qweww 2026-05-11 5/250 2026-05-11 20:23 by Oversize
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭