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xxx幽冥

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于taq酶的弱弱的问题,抱大腿球解答……

今天刚做完限选课实验,提取植物DNA,然后PCR,电泳全军覆没,没出DNA条带……做的时候,一堆人手忙脚乱往PCR管里加东西,老师说我们失败的原因是PCR管子在手里攥太久了,没放冰浴里面,taq酶比较娇气,失活了,但是好奇怪啊,它不是耐高温的么,怎么室温一会就失活了呢?
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泪花雨水

新虫 (初入文坛)


gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-06-03 18:22:53
手攥手里失活的可能性是非常小的,应该是PCR 反应体系加的时候有问题,人多手忙脚乱很容易少加或错加,不过还是建议以后最后加酶,这样加样过程中不用放冰上,也不必担心酶失活
8楼2013-06-01 18:00:55
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

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xxx幽冥(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-31 23:19:03
taq酶一点也不娇气,外面放几天都没事的,还在乎你手里攥会,我觉得这个不是失败的原因。
2楼2013-05-31 19:38:55
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alarace

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xxx幽冥(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-31 23:19:14
“一堆人手忙脚乱往PCR管里加东西”这才是原因吧。
3楼2013-05-31 20:38:15
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xxx幽冥(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-06-01 14:59:28
taq酶不会这么容易失活。只是在任何温度下都有活性,不在冰上混样品容易有非特异扩增和引物二聚体。我觉得可能是体系里面什么东西忘记加或者加错了。
4楼2013-06-01 04:39:15
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