24小时热门版块排行榜    

查看: 5241  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

[求助] T载体自连

做蓝白斑筛选的时候,空白使用不含目的片段的T载体+感受态+SOC培养基做的,但是每次平板里面长出来的白斑和蓝斑都不少,绝大部分是蓝斑。抗生素、X-GAL、IPTG都没有问题,这是载体自连吗?有什么方法减少载体自连的?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

实心小白菜

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2013-05-28 17:03:25
谢谢,我一般都是4度放半天的,1-2天会不会太久了,X-gal都降解了...

怕降解的话可以一直看着,放一天肯定蓝的比半天多,所以我说有的可能就是泛蓝么。。。。。。蓝斑总之不会变白就是了,不用担心,。。。。。。
有啥不高兴的事儿,说出来大家乐呵乐呵~
11楼2013-05-30 09:57:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

protura

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-05-28 19:47:55
个人经验,空白对照中的载体自连是难以避免的,蓝白斑筛选并不绝对,有时做克隆时挑取的白斑也是阴性。只好每次加大挑取菌落的数量,比如3-5个,确保能挑到阳性克隆。
2楼2013-05-28 08:23:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
说明T载体质量不行了。是不是放时间久了?
3楼2013-05-28 08:23:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by protura at 2013-05-28 08:23:03
个人经验,空白对照中的载体自连是难以避免的,蓝白斑筛选并不绝对,有时做克隆时挑取的白斑也是阴性。只好每次加大挑取菌落的数量,比如3-5个,确保能挑到阳性克隆。

我上次一次性挑了20个,结果全是假阳性
4楼2013-05-28 08:29:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +31 医学老男孩 2026-08-13 69/3450 2026-08-16 00:16 by mo_mo_mo_mo
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见