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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 大孔树脂的吸附液浓度跟规定浓度的原始母液的体积有关么
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秋雨夜含

铜虫 (小有名气)

[交流] 大孔树脂的吸附液浓度跟规定浓度的原始母液的体积有关么 已有2人参与

我现在用大孔树脂对我的多糖脱色，经过一定静态吸附后把树脂超载的迹象控制了，但是减少多糖溶液的加入体积（浓度没有改变，只是改变加入的体积），吸附液跟解析液的浓度都减少好多，我大孔树脂用l量是2g，多糖溶液的浓度是0.03mg/ml，加入体积是26ml，原来加入液40ml的时候吸附液和解析液的浓度就大好多，请问各位大神，加入液的体积大小跟吸附浓度有没有关系，还有，体积减少后我的吸附率解析率都变得好低，是否跟洗脱液有关？我在这先谢谢各位虫友了，由于老师催实验催的紧，这个大孔树脂又弄了这么长时间，各种上火各种愁 啊
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做最诚实的实验
1楼 2013-05-26 16:25:17
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wolfman840

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我在做纯化实验时用的是葡聚糖填料，有个有意思的现象就是加入液浓度不变的情况下，上样体积越大，解吸附后浓度越高，回收率越高，跟你的这个情况有点类似。我分析下来是由于解析体积由树脂体积决定，在树脂体积一定时，上样的量越大，解析的浓度越高。
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4楼2013-05-27 14:15:02
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wolfman840

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-06-26 12:27:44
确定检测没有问题？
不了解你的实验进行情况，你说40ml时候超载，那么满载的总多糖质量是多少？你所谓的总浓度是不是上样的多糖质量除以上样体积？吸附浓度是不是上样多糖质量除以柱床体积？
在上样总量不变的情况下，浓度的变化更多来自体积的改变，尤其是在做小规模层析住的时候。
我的蛋白浓度有的时候会差一倍以上呢。但是放大后，体积的影响小了，浓度不合理的情况就不存在了。
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6楼2013-05-28 07:54:58
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wolfman840

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 秋雨夜含 at 2013-05-28 08:30:33
我认为我的检测没有问题，我没有想过满载的总多糖质量。总浓度是我自己配制的，就是我的粗多糖质量除以稀释的体积。我现在还在静态吸附阶段，为了筛选最佳树脂，所以我是测吸附浓度的吸光度值，然后用标准曲线求出 ...

我明白你的做法了，你这样检测的话并不准确，不能单独检测吸附浓度，你需要将其乘以体积，变为质量进行计算。我建议你将结果处理成质量，计算总回收率，如果超过100%，则实验不可信了。其中，回收率应做如下计算（解离质量+未吸附质量）/上样质量。吸附浓度计算吸附质量是不准确的，因为你的实际吸附体积不可知。
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8楼2013-05-28 11:09:56
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wolfman840

木虫 (正式写手)
★
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-06-26 12:27:55
选择填料一般选取回收率高的，就是解离质量较高的填料。在此基础上选择纯度较大的。产量永远是第一。
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9楼2013-05-28 11:11:14
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wolfman840

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-06-26 12:28:11
引用回帖:
10楼: Originally posted by 秋雨夜含 at 2013-06-01 18:24:01
谢谢你了，实在太感谢了，我现在就是正式动态吸附脱色了，然后到最后比较多糖含量，如果脱色率太低的话我就用过氧化氢脱色，但是又不能保证对糖链没有影响...

建议你用小柱子做个DOE，或者查查文献里的工艺。对于多糖纯化我了解的不多。吸附脱色的话，如何去除吸附于柱子上的色素呢？我目前也被这个问题困扰着。我的是培养基色素，按理论来说也是氨基酸和糖之类的东西。
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11楼2013-06-03 14:32:43
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秋雨夜含

铜虫 (小有名气)
2楼2013-05-27 08:39:42
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秋雨夜含

铜虫 (小有名气)
自己顶一个
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做最诚实的实验
3楼2013-05-27 08:44:31
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秋雨夜含

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wolfman840 at 2013-05-27 14:15:02
我在做纯化实验时用的是葡聚糖填料，有个有意思的现象就是加入液浓度不变的情况下，上样体积越大，解吸附后浓度越高，回收率越高，跟你的这个情况有点类似。我分析下来是由于解析体积由树脂体积决定，在树脂体积一定 ...

拿我的多糖做例子，上样的的体积大，就相当于上样的多糖质量也大了，解析的浓度肯定高，我之前用40ml体积的时候，就超载了，但是现在减少到26ml，居然有几个实验出现怪现象，就是吸附后的吸附液浓度大于总浓度了，而且还做了好几遍，都是这种结果，虽然心里明白这肯定不可能，但是不知道哪里出问题了，求解答啊
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做最诚实的实验
5楼2013-05-27 18:45:41
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秋雨夜含

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wolfman840 at 2013-05-28 07:54:58
确定检测没有问题？
不了解你的实验进行情况，你说40ml时候超载，那么满载的总多糖质量是多少？你所谓的总浓度是不是上样的多糖质量除以上样体积？吸附浓度是不是上样多糖质量除以柱床体积？
在上样总量不变的情况 ...

我认为我的检测没有问题，我没有想过满载的总多糖质量。总浓度是我自己配制的，就是我的粗多糖质量除以稀释的体积。我现在还在静态吸附阶段，为了筛选最佳树脂，所以我是测吸附浓度的吸光度值，然后用标准曲线求出浓度的。
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做最诚实的实验
7楼2013-05-28 08:30:33
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秋雨夜含

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wolfman840 at 2013-05-28 11:09:56
我明白你的做法了，你这样检测的话并不准确，不能单独检测吸附浓度，你需要将其乘以体积，变为质量进行计算。我建议你将结果处理成质量，计算总回收率，如果超过100%，则实验不可信了。其中，回收率应做如下计算（ ...

谢谢你了，实在太感谢了，我现在就是正式动态吸附脱色了，然后到最后比较多糖含量，如果脱色率太低的话我就用过氧化氢脱色，但是又不能保证对糖链没有影响
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做最诚实的实验
10楼2013-06-01 18:24:01
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