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秋雨夜含

铜虫 (小有名气)

[交流] 大孔树脂的吸附液浓度跟规定浓度的原始母液的体积有关么 已有2人参与

我现在用大孔树脂对我的多糖脱色,经过一定静态吸附后把树脂超载的迹象控制了,但是减少多糖溶液的加入体积(浓度没有改变,只是改变加入的体积),吸附液跟解析液的浓度都减少好多,我大孔树脂用l量是2g,多糖溶液的浓度是0.03mg/ml,加入体积是26ml,原来加入液40ml的时候吸附液和解析液的浓度就大好多,请问各位大神,加入液的体积大小跟吸附浓度有没有关系,还有,体积减少后我的吸附率解析率都变得好低,是否跟洗脱液有关?我在这先谢谢各位虫友了,由于老师催实验催的紧,这个大孔树脂又弄了这么长时间,各种上火各种愁 啊
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做最诚实的实验
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wolfman840

木虫 (正式写手)


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引用回帖:
7楼: Originally posted by 秋雨夜含 at 2013-05-28 08:30:33
我认为我的检测没有问题,我没有想过满载的总多糖质量。总浓度是我自己配制的,就是我的粗多糖质量除以稀释的体积。我现在还在静态吸附阶段,为了筛选最佳树脂,所以我是测吸附浓度的吸光度值,然后用标准曲线求出 ...

我明白你的做法了,你这样检测的话并不准确,不能单独检测吸附浓度,你需要将其乘以体积,变为质量进行计算。我建议你将结果处理成质量,计算总回收率,如果超过100%,则实验不可信了。其中,回收率应做如下计算(解离质量+未吸附质量)/上样质量。吸附浓度计算吸附质量是不准确的,因为你的实际吸附体积不可知。
8楼2013-05-28 11:09:56
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wolfman840

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我在做纯化实验时用的是葡聚糖填料,有个有意思的现象就是加入液浓度不变的情况下,上样体积越大,解吸附后浓度越高,回收率越高,跟你的这个情况有点类似。我分析下来是由于解析体积由树脂体积决定,在树脂体积一定时,上样的量越大,解析的浓度越高。
4楼2013-05-27 14:15:02
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秋雨夜含

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wolfman840 at 2013-05-27 14:15:02
我在做纯化实验时用的是葡聚糖填料,有个有意思的现象就是加入液浓度不变的情况下,上样体积越大,解吸附后浓度越高,回收率越高,跟你的这个情况有点类似。我分析下来是由于解析体积由树脂体积决定,在树脂体积一定 ...

拿我的多糖做例子,上样的的体积大,就相当于上样的多糖质量也大了,解析的浓度肯定高,我之前用40ml体积的时候,就超载了,但是现在减少到26ml,居然有几个实验出现怪现象,就是吸附后的吸附液浓度大于总浓度了,而且还做了好几遍,都是这种结果,虽然心里明白这肯定不可能,但是不知道哪里出问题了,求解答啊
做最诚实的实验
5楼2013-05-27 18:45:41
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wolfman840

木虫 (正式写手)

★ ★
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137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-06-26 12:27:44
确定检测没有问题?
不了解你的实验进行情况,你说40ml时候超载,那么满载的总多糖质量是多少?你所谓的总浓度是不是上样的多糖质量除以上样体积?吸附浓度是不是上样多糖质量除以柱床体积?
在上样总量不变的情况下,浓度的变化更多来自体积的改变,尤其是在做小规模层析住的时候。
我的蛋白浓度有的时候会差一倍以上呢。但是放大后,体积的影响小了,浓度不合理的情况就不存在了。
6楼2013-05-28 07:54:58
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