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飘逸小公主

金虫 (小有名气)

[求助] TNBS法测修饰度

请问有没有虫友用TNBS法测过修饰度，为什么我测的A0和A1都是负数？
实验方法如下：　　　
(1)移取1.0mL 0.01%(w/v)的TNBS水溶液至1.5mL pH=8.2的Tris-HCl缓冲溶液中，均匀混合后作为空白；
(2)移取1.0 mL 0.01%(w/v)的TNBS水溶液至1. 5mL 0.25mg/mL的天然纤维素酶液中，均匀混合后，室温静置30min，在420nm处测定其吸光度值A0；
(3)移取1.0 mL 0.01%(w/v)的TNBS水溶液T至1.5mL0.25mg/mL的五种修饰纤维素酶液中，均匀混合后，室温静置40分钟，在420nm处测定其吸光度值A1；
(4)根据A0和A1吸光度值可以计算出氨基残基被修饰程度，然后计算出修饰度。测试结果按照下式进行计算：修饰度=(1- A1/A0 )×100%。
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1楼 2013-05-26 10:17:26
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lennon_张

铜虫 (小有名气)
楼主知道原因了吗？同求
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2楼2021-08-09 17:33:17
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