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TNBS法测修饰度
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请问有没有虫友用TNBS法测过修饰度，为什么我测的A0和A1都是负数？ 实验方法如下： (1)移取1.0mL 0.01%(w/v)的TNBS水溶液至1.5mL pH=8.2的Tris-HCl缓冲溶液中，均匀混合后作为空白； (2)移取1.0 mL 0.01%(w/v)的TNBS水溶液至1. 5mL 0.25mg/mL的天然纤维素酶液中，均匀混合后，室温静置30min，在420nm处测定其吸光度值A0； (3)移取1.0 mL 0.01%(w/v)的TNBS水溶液T至1.5mL0.25mg/mL的五种修饰纤维素酶液中，均匀混合后，室温静置40分钟，在420nm处测定其吸光度值A1； (4)根据A0和A1吸光度值可以计算出氨基残基被修饰程度，然后计算出修饰度。测试结果按照下式进行计算：修饰度=(1- A1/A0 )×100%。 |
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