| 查看: 1087 | 回复: 12 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
核酸提取求助:帮忙分析下失败原因在哪?
|
|||
|
我的提取程序是200ul总消化体积,1%SDS,200ug/ml,消化过夜..... 之后是标准酚氯仿抽提.... 1%琼脂糖凝胶检测 只有最前沿有很弱的拖带出现(疑似RNA) 酚抽提后加入氯仿异戊醇(24:1)后离心后 上清很浑浊 出现大量絮状沉淀(这些是什么 蛋白质么?) , 加入氯仿异戊醇(24:1)后 好象无法混匀 始终是分层状态,这样正常么,不是要摇成乳状,再离心么 我重新提了一次还是这个样子 [ Last edited by linkfuture on 2007-10-12 at 11:58 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
所感
已经有3人回复
-
要不要辞职读博？
已经有7人回复
-
不自信的我
已经有11人回复
-
北核录用
已经有3人回复
-
实验室接单子
已经有3人回复
-
磺酰氟产物，毕不了业了！
已经有8人回复
-
求助:我三月中下旬出站，青基依托单位怎么办？
已经有10人回复
-
26申博（荧光探针方向，有机合成）
已经有4人回复
-
论文终于录用啦！满足毕业条件了
已经有26人回复
-
2026年机械制造与材料应用国际会议 （ICMMMA 2026）
已经有4人回复
9楼2007-10-12 14:29:41
guohuayin
木虫 (著名写手)
博士，副教授
- 应助: 23 (小学生)
- 金币: 3338.8
- 散金: 265
- 红花: 17
- 帖子: 1521
- 在线: 101.7小时
- 虫号: 219355
- 注册: 2006-03-13
- 性别: MM
- 专业: 植物病理学
★ ★
telomerase(金币+2,VIP+0):thanks!欢迎来多多交流！！！
telomerase(金币+2,VIP+0):thanks!欢迎来多多交流！！！
|
抽提核酸中我的做法是 首先加入等体积的苯酚：氯仿：异戊醇（体积比25：24：1），轻轻上下颠倒几次，混匀2分钟左右，12000rpm，离心10分钟； 然后吸取上清液，加入等体积的氯仿：异戊醇（体积比24:1)和上面的步骤一样，抽提一次，取上清 这两步试验可以反复三次，主要是去除蛋白质和糖类等杂质。 最后加入1/10体积的3M的醋酸钠（.PH5.3），2倍体积的无水乙醇沉淀DNA。 －20度放置30分钟，室温15000rpm,离心10分钟，沉淀用70％的乙醇洗涤去除盐分，稍微干燥后，加入适量的缓冲液溶解。－20度冰箱中保存。 [ Last edited by guohuayin on 2007-10-9 at 16:33 ] |
2楼2007-10-09 16:31:15
3楼2007-10-10 12:19:10
yangguoxing888
金虫 (小有名气)
瑜瑾
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1330.9
- 散金: 90
- 帖子: 282
- 在线: 20.8小时
- 虫号: 289916
- 注册: 2006-10-28
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2007-10-10 12:31:18