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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » His-Tag Monoclonal Antibody 能识别几个组氨酸啊？
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liu_chen_na

新虫 (初入文坛)

[求助] His-Tag Monoclonal Antibody 能识别几个组氨酸啊？

如题，
C端融合6*His标签，过镍柱出现四条带，其中一条跟预测蛋白大小一样，其他可能是杂蛋白？
我的疑问是，我用标签抗体去检测，当杂蛋白的组氨酸不等于六会不会检测出来？
我的抗体是通过6*His合成多肽抗原产生的。
请教高手，对免疫不是很了解。
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1楼 2013-05-25 22:20:29
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
liu_chen_na(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-26 13:27:05
liu_chen_na: 金币+3, ★有帮助 2013-05-26 18:16:39
这个与你的抗体相关，常用的有抗5个与6个，但这里不是说3个his就一定抗不出带，有时候也有抗出虽然信号弱点。那些可以纯化出来的蛋白你可以利用梯度咪唑洗脱来解决。
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2楼2013-05-26 06:08:43
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liu_chen_na

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stevenshi021 at 2013-05-26 06:08:43
这个与你的抗体相关，常用的有抗5个与6个，但这里不是说3个his就一定抗不出带，有时候也有抗出虽然信号弱点。那些可以纯化出来的蛋白你可以利用梯度咪唑洗脱来解决。

谢谢了，准备先做一个WB看看条带，再根据条带来进行梯度洗脱。
我们买的是热电的200ul填料的预装柱，进行梯度洗脱很不方便啊。
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3楼2013-05-26 18:16:15
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