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liu_chen_na

新虫 (初入文坛)

[求助] His-Tag Monoclonal Antibody 能识别几个组氨酸啊?

如题,
C端融合6*His标签,过镍柱出现四条带,其中一条跟预测蛋白大小一样,其他可能是杂蛋白?
我的疑问是,我用标签抗体去检测,当杂蛋白的组氨酸不等于六会不会检测出来?
我的抗体是通过6*His合成多肽抗原产生的。
请教高手,对免疫不是很了解。
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
liu_chen_na(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-26 13:27:05
liu_chen_na: 金币+3, 有帮助 2013-05-26 18:16:39
这个与你的抗体相关,常用的有抗5个与6个,但这里不是说3个his就一定抗不出带,有时候也有抗出虽然信号弱点。那些可以纯化出来的蛋白你可以利用梯度咪唑洗脱来解决。
2楼2013-05-26 06:08:43
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liu_chen_na

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stevenshi021 at 2013-05-26 06:08:43
这个与你的抗体相关,常用的有抗5个与6个,但这里不是说3个his就一定抗不出带,有时候也有抗出虽然信号弱点。那些可以纯化出来的蛋白你可以利用梯度咪唑洗脱来解决。

谢谢了,准备先做一个WB看看条带,再根据条带来进行梯度洗脱。
我们买的是热电的200ul填料的预装柱,进行梯度洗脱很不方便啊。
3楼2013-05-26 18:16:15
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