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关于双酶切后回收的问题
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各位大神 我最近在做原核表达。我的蛋白编码基因大小大约只有300bp，用带酶切位点的引物p出来后连19T载体测序正确。然后用Bam HI和Hind III这两种酶切3小时。但是酶切完每次跑电泳下来切下来的T载体的条带特别亮，但是目的片段特别暗，几条带一起回收都回收不出来东西。实在很郁闷。是不是因为我的目的片段相对于T载体太小了？有什么办法能解决么？ 或者我能不能直接从含T载体的大肠杆菌菌液里pcr出目的片段直接双酶切？ 希望各位赐教哈 |
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