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aofeng860308木虫 (正式写手)
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[求助]
纯化时蛋白一上柱就絮凝
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恼死了，用大肠杆菌表达系统表达了一蛋白，可溶，在上清中。可是纯化时，将蛋白一加到Ni2+柱中，马上就絮凝了，与填料一起结合成团状的东西。 起初蛋白浓度挺高，在4℃下和-20℃下过夜都会絮凝起来，后来将蛋白溶液稀释了5-8倍，保存时不会出现絮凝了，可是一上柱又出现了絮凝，真是搞不懂了！ 请大侠们给我分析分析，究竟怎么回事？能不能再给我提点建议什么的，谢谢啦！ |
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15楼2013-05-24 15:01:18
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
aofeng860308(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-24 03:14:48
aofeng860308: 金币+1, ★有帮助, OK，Let me try，Thank you。 2013-05-24 10:25:18
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| try to add more NaCl salt into the buffer, load less sample to the column. Furthermore, adjust your PH to see if under different PH can maximize the protein's dissolvability. |
2楼2013-05-24 00:30:51
3楼2013-05-24 08:22:45
aofeng860308
木虫 (正式写手)
- 应助: 53 (初中生)
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4楼2013-05-24 10:18:36