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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pcr问题
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...山雨

新虫 (初入文坛)

[求助] pcr问题

取1ul基因组做模板pcr后，为啥电泳时胶上没有该基因组对应的条带呢？取同样的1ul直接电泳就有带啊。
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1楼 2013-05-21 11:38:20
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xuzl0516

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
...山雨: 回帖置顶 2013-06-12 22:23:48
一个是PCR体系使模板浓度降低了导致不显示出带，另外主要是PCR过程中模板会分别断裂成不同大小的片段，那就更不会显现了，我表述的狗明白吗？
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13楼2013-05-22 10:17:49
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愤怒的小笨鸟

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
模板浓度太高，稀释50倍，100倍后取1uL试试
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2楼2013-05-21 11:45:45
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j134104

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
取1ul基因组做模板pcr后，这样1ul就稀释到了25ul了。然后你取其中的3ul点样，当然没条带

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2013-05-21 12:44:44
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR时模板浓度太高会影响特异性，甚至什么都P不出来。如果1μl的基因组DNA可以看到条带，说明样品浓度很高了，你应该稀释模板后再做PCR。
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4楼2013-05-21 14:20:34
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