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jiangnanlw

铁虫 (初入文坛)

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[求助] 革兰氏阳性菌群体感应信号分子如何检测分离与鉴定已有3人参与

如题，报道的都是革兰氏阴性菌的AHLs的检测分离方法，求助有没有革兰氏阳性菌的。
或者有没有什么相关文献供参考呢~
~谢谢！

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不学术

1楼 2013-05-17 21:50:35

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csyhaoge

银虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★
laozuzunzhe: 金币+2, MicEPI+1, good！ 2014-04-02 21:00:21

对于寡肽类的信号分子，我之前做过的一些实验希望可以给你们一点点帮助~
信号分子的分离纯化：首先，因为是肽类，大多数人会考虑用蛋白沉降那一块的技术，但根据我之前的实验结果看，信号分子提取得到的量很微小，所以不建议采用那一块的实验技术。另外，多数人会考虑跑SDS-PAGE分离多肽类物质，笔者个人不推荐此项技术，因为蛋白电泳，无论是考马斯法染色还是银染，存在着一个较为致命的缺点（但对一般的蛋白质不明显），就是蛋白电泳的分辨率问题，多肽或蛋白的肽键数目较多时，其才能在电泳胶上显示的出来，肽键数少时，什么都看不到。若采用此类方法，祈求你目的得到的寡肽类信号分子肽键数足够吧....
比较推荐的技术有：AKTA蛋白纯化（柱子的灵敏度要求稍高）、HPLC分离分析（分离的液相条件的话，呵呵，可能要比较辛苦的摸索一下，推荐看下液相色谱对小多肽类物质的分离纯化等相关文献，上面会给出一些多肽类物质的液相条件，可以参考下）、TLC层析技术（如果得到的寡肽类信号分子量足够大的时候）。